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Misurare Protein Stabilità in Living embrioni di zebrafish Usando fluorescenza Decay Dopo Fotoconversione (FDAP)
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Measuring Protein Stability in Living Zebrafish Embryos Using Fluorescence Decay After Photoconversion (FDAP)
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Misurare Protein Stabilità in Living embrioni di zebrafish Usando fluorescenza Decay Dopo Fotoconversione (FDAP)

DOI:
10.3791/52266-v

•

09:45 min

•

January 28, 2015

•

, , ,
1Department of Molecular and Cellular Biology,Harvard University, 2Systems Biology of Development Group,Friedrich Miescher Laboratory of the Max Planck Society

Chapters

  • 00:05Title
  • 01:27Generating a Photoconvertible Fusion Construct and Injecting Dechorionated Zebrafish Embryos
  • 03:22Mounting Zebrafish Embryos for Photoconversion and Confocal Imaging
  • 04:37Photoconverting and Measuring the Decrease of the Photoconverted Signal
  • 06:47Analyzing the Data Using PyFDAP
  • 08:18Results: Half-life of Squint-Dendra2 as Determined by Fluorescence Decay After Photoconversion during Embryogenesis
  • 09:19Conclusion

Summary

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I livelli di proteine ​​nelle cellule e tessuti sono spesso strettamente regolati dal saldo della produzione di proteine ​​e di liquidazione. Usando fluorescenza Decay Dopo Fotoconversione (FDAP), la cinetica di clearance di proteine ​​possono essere sperimentalmente misurati in vivo.

Tags

Protein StabilityFluorescence Decay After PhotoconversionFDAPProtein Clearance KineticsPhotoconvertible Fluorescent ProteinZebrafish EmbryosCompartmental AnalysisIntra- And Extracellular Half-livesSecreted Signaling ProteinsIn Vivo Protein Dynamics

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