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Produktion von Disulfid-stabilisierte Transmembrane Peptid-Komplexe für Structural Studies
JoVE 杂志
化学
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JoVE 杂志 化学
Production of Disulfide-stabilized Transmembrane Peptide Complexes for Structural Studies
DOI:

12:05 min

March 06, 2013

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Chapters

  • 00:05Title
  • 02:06Inclusion Body Preparation and Nickel Matrix Binding
  • 03:55On-column Oxidative Crosslinking
  • 04:50TFA Elution and Quantitation
  • 05:52CNBr Digestion
  • 07:54Reversed-phase HPLC Purification of Disulfide-crosslinked Peptide Complexes
  • 09:06TrpLE fusions: Transmembrane Peptide Complexes Expressed in Bacteria
  • 11:19Conclusion

Summary

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Biophysikalische und biochemische Untersuchungen der Wechselwirkungen zwischen den membranständigen eingebettet Proteindomänen stehen viele technische Herausforderungen, von denen der erste Abschluß einer entsprechenden Studie Material ist. Dieser Artikel beschreibt ein Protokoll zur Herstellung und Reinigung Disulfid-stabilisierten Transmembran-Peptid-Komplexe, die geeignet für die Strukturanalyse durch Lösungspolymerisation Kernspinresonanz (NMR) und andere analytische Anwendungen sind.

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