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Efficient Gene Delivery into Multiple CNS Territories Using In Utero Electroporation

Entrega Gene eficiente em múltiplos territórios CNS Usando In Utero Eletroporação

DOI:
10.3791/2957-v

•

13:12 min

•

June 23, 2011

•

, , , , , ,
1Department of Biochemistry and Molecular Biology, Hotchkiss Brain Institute, Alberta Children’s Hospital Research Institute,University of Calgary , 2Department of Medical Genetics, Alberta Children’s Hospital Research Institute, Hotchkiss Brain Institute,University of Calgary

Chapters

  • 00:05Title
  • 03:06Set-up and Anesthesia
  • 04:26Animal Preparation for Surgery
  • 05:21Incision and Exposure of Uterine Horns
  • 06:45Injection of DNA into Vesicles
  • 08:23Electroporation
  • 09:13Suturing and Stapling
  • 10:12Fluorescent Protein Expression in Multiple CNS Territories of Electroporated Embryonic Mouse Brain
  • 11:52Conclusion

Summary

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Na eletroporação útero permite a entrega rápida em um gene espacialmente e temporalmente maneira controlada no desenvolvimento do sistema nervoso central (SNC). Aqui nós descrevemos um adaptável altamente in utero protocolo de eletroporação que pode ser usado para entregar constrói expressão em vários domínios embrionário do SNC, incluindo o telencéfalo diencéfalo e retina.

Tags

Gene DeliveryCNS TerritoriesIn Utero ElectroporationGene ExpressionDevelopmental PathwaysTransgenic TechnologiesLoss-of-function ModelsGain-of-function ModelsMouse TransgenicsAlternative MethodsLive Mouse EmbryosDNA InjectionElectrical CurrentCell MembranesEmbryonic Day (E) 11.5Ultrasound-guided Microinjection ProtocolE15.5 StageParietal Bone DifferentiationFrontal Bone DifferentiationRetina

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