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Examinar la dinámica conformacional de las proteínas de membrana In situ Sitio-dirigida con fluorescencia de etiquetado
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11:55 min
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May 29, 2011
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Vamos a describir un método que mide la cinética del transporte de iones de proteínas de membrana junto con el sitio específico de análisis de los cambios conformacionales con fluorescencia en células individuales. Esta técnica se adapta a los canales iónicos, transportadores y bombas iónicas y pueden ser utilizados para determinar las limitaciones distancia entre subunidades de la proteína.
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Conformational DynamicsMembrane ProteinsSite-directed Fluorescence LabelingTwo Electrode Voltage Clamp Electrophysiology (TEVC)Ion TransportIon ChannelsIon PumpsTransportersSite-specific Fluorophore LabelingConformational DynamicsVoltage-clamp FluorometryCysteine ReplacementSite-directed Fluorophore LabelingMolecular MotionDistance ConstraintsXenopus Leavis OocytesFunctional ExpressionFluorescence Signal
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Richards, R., Dempski, R. E. Examining the Conformational Dynamics of Membrane Proteins in situ with Site-directed Fluorescence Labeling. J. Vis. Exp. (51), e2627, doi:10.3791/2627 (2011).
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