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Primer-Free Selezione aptamero utilizzando una libreria di DNA casuale
JoVE 杂志
生物学
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JoVE 杂志 生物学
Primer-Free Aptamer Selection Using A Random DNA Library
DOI:

11:14 min

July 26, 2010

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Chapters

  • 00:04Title
  • 00:12Introduction
  • 01:39Preparation of PF Library-DNA Fragments
  • 03:26Preparation of S100B-bound Beads
  • 04:55Selection & Recovery of Aptamers
  • 06:40TOPO Cloning and Sequencing
  • 07:17Sandwich Binding Assays
  • 09:11Representative Results
  • 10:35Conclusion

Summary

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Protocolli di SELEX comprendono vari cicli di selezione, ognuno dei quali richiedono la rigenerazione di leganti legato, che a loro volta richiedono sequenze primer fisso fiancheggianti le regioni biblioteca casuale. Queste sequenze di innesco fisso può interferire con il processo di selezione (falsi positivi e negativi). Qui vi presentiamo un primer senza protocollo.

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