Мы применяем без наклеек анализа взаимодействия белков использованием Biacore X100 для структуры и функции анализа связывания нескольких мутантов B цистатина к папаин через кинетические характеристики. Калибровка без анализа концентрации (ЦАФД) измеряет концентрацию белка с сохраненными связывающей активностью без необходимости использования стандартной кривой. Мы покажем, что подтверждение концентраций с использованием ЦАФД повышает надежность кинетического анализа и кинетических констант может надежно определить, даже если активность рекомбинантного белка снижается.
Pol, E. The Importance of Correct Protein Concentration for Kinetics and Affinity Determination in Structure-function Analysis . J. Vis. Exp. (37), e1746, doi:10.3791/1746 (2010).