Journal
/
/
A importância da concentração de proteína correta para Cinética e Determinação Affinity na estrutura-função Análise
JoVE 杂志
生物学
This content is Free Access.
JoVE 杂志 生物学
The Importance of Correct Protein Concentration for Kinetics and Affinity Determination in Structure-function Analysis

A importância da concentração de proteína correta para Cinética e Determinação Affinity na estrutura-função Análise

20,227 Views

19:16 min

March 17, 2010

DOI:

19:16 min
March 17, 2010

11 Views

Summary

Automatically generated

Nós aplicamos rótulo sem análise da interação da proteína usando X100 Biacore para estrutura-função de análise da ligação de mutantes B várias cistatina à papaína através da caracterização cinética. Calibração livre de análise de concentração (ACCP) mede a concentração de proteína com actividade de ligação retida sem a necessidade de uma curva padrão. Nós mostramos que a confirmação de concentrações usando ACCP aumenta a confiabilidade da análise cinética e que constantes cinéticas pode ser determinada de forma confiável, mesmo que a atividade de uma proteína recombinante é reduzida.

Read Article