कैनेटीक्स और संरचना समारोह विश्लेषण में आत्मीयता निर्धारण के लिए सही प्रोटीन एकाग्रता का महत्व
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March 17, 2010
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हम लागू लेबल मुक्त प्रोटीन बातचीत विश्लेषण का उपयोग कई cystatin बी म्यूटेंट के लिए बाध्य गतिज लक्षण वर्णन के माध्यम से papain का विश्लेषण संरचना समारोह के लिए Biacore X100. अंशांकन मुक्त एकाग्रता विश्लेषण (CFCA) बनाए रखा बाध्यकारी गतिविधि के साथ एक मानक वक्र के लिए आवश्यकता के बिना प्रोटीन की एकाग्रता के उपाय. हम सांद्रता की कि पुष्टिकरण का उपयोग CFCA गतिज विश्लेषण की विश्वसनीयता बढ़ जाती है और कि गतिज स्थिरांक मज़बूती से निर्धारित किया है भले ही एक पुनः संयोजक प्रोटीन की गतिविधि कम है किया जा सकता है दिखाते हैं.
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Pol, E. The Importance of Correct Protein Concentration for Kinetics and Affinity Determination in Structure-function Analysis . J. Vis. Exp. (37), e1746, doi:10.3791/1746 (2010).
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