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正确的蛋白浓度的动力学结构与功能分析和亲和力测定的重要性
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March 17, 2010
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我们采用无标记蛋白质相互作用分析利用Biacore X100几个胱抑素乙突变体的结合，木瓜蛋白酶，通过动力学特性的结构与功能分析。无标定浓度分析中心（CFCA）的措施，而不需要为标准曲线与保留结合活性的蛋白浓度。我们表明，浓度使用CFCA增加的动力学分析的可靠性，并能够可靠地确定，即使重组蛋白的活性降低，动力学常数确认。
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Protein ConcentrationKineticsAffinity DeterminationStructure-function AnalysisCysteine Protease InhibitorCystatin BPapainReal-time Label-free AnalysisBiacore X100Point MutationsInteractionCalibration-free Concentration Analysis (CFCA)A280Single-cycle Kinetics (SCK)Association Rate Constant (ka)Affinity (KD)Reliable ResultsInteraction Mechanism
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Pol, E. The Importance of Correct Protein Concentration for Kinetics and Affinity Determination in Structure-function Analysis . J. Vis. Exp. (37), e1746, doi:10.3791/1746 (2010).
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