木蟻で visual の古典的条件付け

1.フォーマイカ西隣の植民地を維持します。 注: 本研究に使用 (フォーマイカ西隣L.) 木製のアリ ・ コロニーは、アシュダウン フォレスト、サセックス、イギリスから収集された (N 51 4.680、E 0 1.800)。英国内で 7 月と 8 月の間F. 西隣のコロニーを収集します。巣の良い割合を削除する必要があります、数百の労働者とひな、植民地を確保するため、持続的なを含むと長期間にわたってアクティブ時間 (1 年間)。巣除去前に関係当局から許可を得なければなりません。 ワイド ボックスで木蟻コロニーの家 (約 135 cm × 70 cm × 35 cm) 12 h ライト: 12 下 21 ° C で、エスケープからアリを防ぐために (例えばフロン)、ポリテトラフルオロ エチレン (PTFE) 樹脂で覆われて壁-h 暗いサイクル。 水ディスペンサーを使用してアリにショ糖 (333 g/L) と水を提供します。アリの食事が蛋白質で豊富なことを確認、冷凍コオロギ 2 倍 1 週間でコロニーをフィードします。高温多湿に保つために、毎日水と巣をスプレーします。 植民地の衛生状態を改善するために松脂必要な場合を追加します。松の樹脂は、木蟻のコロニー17で寄生を低減します。アリはそれで死んだコロニー メンバーを沈殿できるように巣の中小さい容器 (約 15 センチ直径の 5 cm) を配置します。 実験を試みる前に収集した後、少なくとも 2 週間は、船首に記載の条件の下でアリを保つため。アリ意欲が向上、実験前に 2 d を餓死に巣からショ糖を削除します。 2 を選択してアリを活用 注: アリを活用するため特注のホルダーが必要です。モデリング粘土を使用してこれが構築でき、段ボールを開くカットの水平方向にそれに接続されています。段ボールの上面は部分的昆虫ピン固定中に添付することを許可するワックスでコーティングする必要があります。慎重な取り扱いは、トレーニング前にストレスの高いレベルにそれらを服従させることを避けるために、アリを活用このプロトコル (メンテナンス、トランスポート、および実験を含む)、しかし特にステップごとに必要です。 アリを食べる意欲を選択すると、小さなボックス内スクロース (200 g/L) のドロップでスライドに配置 (約 14 cm × 8 cm × 5 cm) 壁脱出を防ぐために PTF 樹脂で覆われています。巣から木材や死んだアリを運んでいるアリを選択しないでください。代わりに、これらは食べ物を探すため巣を残してしようとして受動的探索担当になりやすいので、巣の壁を這っている蟻を取る。 ボックスでそれぞれのアリを置き、かどうかそれはショ糖のドロップでフィードを参照してくださいするを待ちます。場合は、飽食を防ぐために別の空のボックスにすぐに転送します。 それぞれのアリを別のチューブに転送します。アリを固定する各チューブに 1-2 分冷凍庫または最大 5 分の砕いた氷を配置します。 頭部と胸部がその間のジョイントによって、段ボールのカットをホルダーに固定された ant を配置します。アンテナを側頭部、厚紙の上にワックス層に埋め込まれている昆虫のピンを使用して確保します。 カスタムメイドの加熱要素を使用して、ant の頭に昆虫ピンの先端を段ボールに平行にワックスします。この中に、それらへの損傷を避けるためにヒーター エレメントとアンテナ配線に触れないで。 ワックスが乾燥した後は、アンテナを固定する昆虫ピンを取り外してホルダーからアリを慎重に取り外します。 修正アリを保持昆虫ピン モデリング粘土でシリンダーと修正アリの確保、その下にオーダーメイド プラスチックのホルダーが典型的な姿勢を維持し、体全体が自由に移動することを除いて頭。 トレーニング前に少なくとも 2 時間の暗闇の中でよう注意を払うアリを維持します。 3. トレーニング セットとテスト セットアップ、条件刺激と無条件刺激 実験者に対してアクセスを許可する前に開いている白いアクリル ボックス (50 × 50 × 50 cm) で実験を行います。カメラがアリの行動を記録します。 ボックスの上面の穴から、ant 上に直接マクロ レンズとカメラを配置します。 任意の余分な視覚的な手掛かりを減らすためには、アクリル ボックス (2 つの 26 W ライト) の上部を直接指している光源を除いて暗闇の中で部屋を保ちます。 視覚的な合図 (CS) として明るい青 (スペクトル図 S1) 段ボール四角形を使用 (60 × 45 mm) 中心に針、注射器 (2 mL) に接続に接続されている、米国 (ショ糖 200 g/L) アリ (図 1 aおよび1B に手動で配信されます).注: ショ糖液可能任意の白い砂糖で色と水に溶解したときの臭気があるないこと。 並行して、ペア、無作為の順序で (以下の説明を参照)、対になっていないトレーニングの 2 種類を行います。注: この研究では、我々 注意を払っていない、視覚の性質を。手玉と報酬間の関連付けのみが考慮されました。色と形がテストされなかった、他の機能と CS と同様の結果を生成可能性があります。それにもかかわらず、同じ属からアリがカバー青色18の波長に敏感であると示されているので、青い色が選ばれました。 ペアのトレーニング注: ペアの研修では、CS と米国として記載してすべての試験お互い (図 1) に関連付けられています。 アリが自発的に実行していないことマラー プレゼンテーションの前に確実に CS を提示する前にアリ 10 s を録音を開始します。アリは、この期間中にマラーを行う、数秒のための試験を延期します。任意の ant は、継続的にこの動作を示している場合は、解析から除外します。 〜 10 の ant の前に注射器 + CS を移動 s、針の先端を隔てて ant の顔と最大 5 mm 上記のそれぞれの側に。この時間の間に、(図 1 b) アンテナに触れることがなく蟻の頭に針の先端をできるだけ近くに移動します。注: モーションは、ミツバチ6の視覚の連合学習の役割を果たすに示されているために、CS を提示するとき含まれていた。 シリンジ先端からショ糖の一滴をしみ出させるし、触角と口器、ショ糖を検出するための ant を許可するの横にあるスクロースのドロップを配置する圧力を適用します。約 5 フィードに ant を許可する s。注: 各試行で消費されるショ糖アリの量はだったこれらの実験では制御されません。ショ糖をアリにフィードが約 5 自由にフィードを許可するのに十分な大きさにする必要がありますのドロップ s。 この手順を 10 x 5 分の ITI。メモ: これらの実験でアクリル ボックスの開放側に近い右目の右には常にアリが電源。したがって、CS は常に、右側からアリを近づいた。けれどもこれは学習を無効にしない場合、これらの実験が可能な側の任意の効果を避けるために、右に左にアリの半 々 にすることで実施できます。 対になっていないトレーニング注: このトレーニングはアリに CS または米国別に献上、されて、これらの 2 つの刺激、したがって、時間 (図 1) をかけてお互いから分離しました。 各試験前にアリ 10 s の記録を開始します。 ペアになっているトレーニングと同様の方法で CS を提示、アリにショ糖を提供しません。 2.5 分後に、注射器を使用して接続されている CS なし (アンテナ) にも触れる口器に直接米国を提供します。 CS の体験版で起動し、この手順 10 を繰り返します 2.5 分の ITI とそれらの間をインターカ レート試験の種類ごとに x。 テスト注: テストの最後のトレーニング試験後実施のみ 1 x、どちらか 10 分または 1 時間をする必要があります。CS ではなく、米国にアリが表示されるテストは以前に形成された連想記憶の絶滅を引き起こす可能性があります。 テスト前にアリ 10 s の記録を開始します。 約 10 のための ant に CS を提示 s。 蟻はショ糖のテストの後に提供することによってフィードにまだやる気を確認します。 4. データの収集と分析 上記、10 のアリの行動を記録 s 各試験前に、CS と米国のプレゼンテーション中に。事後分析のためすべての試験とテストが記録されることを確認します。 トレーニングとテスト中に行われた録音を使用してスコア、10 の間にアリのレスポンス CS プレゼンテーションの s。 3 種類の拡張子、口器の動きに応じて動作に CS プレゼンテーション中に別のアリの応答: 完全伸展運動 (有限要素法) と供給、動き (FE) のない完全な拡張や部分的な拡張 (PE) の場合と同様、上顎唇や上顎 palps (図 2 a – 2 D)。分析のため 1 つの応答 (図 2 e) としてすべてのマラーの種類をグループ化します。 あらゆる試験およびテストのないフィードは ant を除外します。注: 分析のため個々 の蟻を考慮した統計的検定をお勧め、それにより個人内変動の会計します。バイナリの方法 (肯定応答の 1 と応答なしの場合は 0) で訓練中にアリの反応を分類するとき、混合効果とロジスティック回帰はお勧め16,19です。各訓練試験またはテスト、 Gの応答アリの割合を比較するため-テストまたはフィッシャーの正確なテストが推奨、アリ分析16,20数に応じて。