Summary

مضبوطات اليكتروكونفولسيفي في الفئران وتجزئة لهذه هيبوكامبي دراسة التغيرات المستحثة بالضبط في البروتينات بوستسينابتيك الكثافة

Published: August 15, 2017
doi:

Summary

Electroconvulsive الاستيلاء (ECS) نموذج حيوانات تجريبية للعلاج اليكتروكونفولسيفي للاكتئاب الشديد. ECS عالمياً يحفز النشاط في قرن آمون، مما يؤدي إلى سينابتوجينيسيس واللدونه متشابك. وهنا يصف لنا طرق الاستقراء ECS في الفئران ووجود سوبسيلولار من هيبوكامبي بهم دراسة التغيرات المستحثة بالضبط في البروتينات متشابك.

Abstract

الاستيلاء على اليكتروكونفولسيفي (ECS) نموذج حيوانات تجريبية electroconvulsive العلاج، العلاج الأكثر فعالية للاكتئاب الشديد. ECS يستحث المعمم منشط رمعي المضبوطات مع انخفاض معدلات الوفيات، وموت الخلايا العصبية، وهو نموذج يستخدم على نطاق واسع للعقاقير المضادة للصرع الشاشة. هنا، يمكننا وصف أسلوب الاستقراء ECS في الذي يتم تسليم الحالي 55-اماه موجزاً عن 0.5 الجرذان s للذكور 200-250 جم في الوزن عن طريق أقطاب مشبك الإذن. هذا التحفيز الثنائية أنتجت المرحلة 4-5 رمعي المضبوطات التي استغرقت حوالي 10 ثانية. بعد وقف ECS الحاد أو المزمن، شام معظم الفئران استعادت منشودا سلوكيا من الفئران “لا مصادرة”. لأنه يرفع ECS عالمياً نشاط الدماغ، كما استخدمت لدراسة التعديلات المعتمدة على نشاط البروتينات متشابك وآثارها على قوة متشابك باستخدام أساليب متعددة. على وجه الخصوص، يتيح تجزئة سوبسيلولار بوستسينابتيك كثافة (PSD) في تركيبة مع النشاف الغربية لتحديد كمي لوفرة البروتينات متشابك في هذا الهيكل متشابك المتخصصة. على النقيض من أسلوب تجزئة سابقة التي تتطلب كمية كبيرة من أدمغة القوارض، يصف لنا هنا أسلوب تجزئة صغيرة لعزل مديرية الأمن العام من هيبوكامبي من فأر واحد، دون السكروز التدرج الطرد المركزي. باستخدام هذا الأسلوب، نظهر أن الكسر PSD معزولة تحتوي على بروتينات الغشاء بوستسينابتيك، بما في ذلك PSD95، GluN2B، و GluA2. سينابتوفيسين ماركر presynaptic وقابل للذوبان بروتين هيولى α-tubulin استبعدت من الكسر مديرية الأمن العام، مما يدل على نجاح PSD العزلة. وعلاوة على ذلك، انخفض ECS المزمنة التعبير GluN2B في مديرية الأمن العام، مشيراً إلى أن لدينا أسلوب تجزئة PSD الصغيرة يمكن تطبيقها على الكشف عن التغييرات في البروتينات PSD هيبوكامبال من فأر واحد بعد العلاجات الجينية أو صيدلانية أو الميكانيكية .

Introduction

وقد استخدمت العلاج اليكتروكونفولسيفي لعلاج المرضى الذين يعانون من اضطرابات الاكتئاب الرئيسية، بما في ذلك الاكتئاب المقاوم للعقاقير والاكتئاب الثنائي القطب وأمراض باركنسون ومرض الفصام1،2. في هذا العلاج، وتولد الاستيلاء على التحفيز الكهربائي تسليمها إلى رئيس تخديره من المرضى عن طريق ابيكرانيال أقطاب1،،من23. وقد الإدارة المتكررة من ECS سريرياً مفيدة لاضطرابات الاكتئاب المقاوم للأدوية1،،من23. ومع ذلك، ظل الآلية الدقيقة الأساسية الطويلة الأجل فعالية تأثير الاكتئاب في البشر هدفا بعيد المنال. ECS هو نموذج حيوان للعلاج اليكتروكونفولسيفي، ويستخدم على نطاق واسع للتحقيق في آليته العلاجية. في القوارض، ECS الحادة والمزمنة ECS العلاج تعزيز الخلايا الكبار في هيبوكامبي وإعادة تنظيم شبكات عصبونية4،5، التي من المرجح أن تساهم التحسينات في المرونة المعرفية. وعلاوة على ذلك، يغير الارتفاع العالمي لنشاط الدماغ ECS وفرة النصوص، مثل دماغ المستمدة عامل تم6، والبروتينات متعددة، بما في ذلك ميتابوتروبيك غلوتامات مستقبلات 17 و N-الميثيل-د-اسبارتاتي (نمدا) نوع غلوتامات مستقبلات مفارز7. وتشارك هذه التغييرات في وساطة طويلة الأجل التعديل رقم المشبك وهيكل وقوة في8،،من7الحصين9.

في نماذج ECS، يتم تسليم التحفيز الكهربائي للقوارض عن طريق أقطاب مزروع ستيريوتاكسيكالي أو أقطاب القرنية أقطاب الإذن لاستحضار المضبوطات منشط رمعي المعمم10،11. ستيريوتاكسيك غرس أقطاب ينطوي على جراحة الدماغ، ويتطلب قدرا كبيرا من الوقت لتحسين مهارات المجرب العمليات الجراحية للتقليل من الإصابة. يمكن أن يسبب كشط القرنية وجفاف أقطاب القرنية أقل الغازية وتتطلب التخدير. استخدام أقطاب الإذن-كليب يتجاوز هذه القيود لأنها يمكن استخدامه على القوارض دون الجراحة أو التخدير، وتتسبب في إصابة الحد الأدنى. وفي الواقع، وجدنا أن الفئران تم تسليمها إلى مستيقظا الحالية عن طريق أقطاب الإذن-كليب موثوق الحث على مضبوطات منشط رمعي المرحلة 4-5 ويغير البروتينات متشابك في هذه هيبوكامبي10.

دراسة وفرة المستحثة ECS البروتينات متشابك في مناطق محددة من الدماغ القوارض، من المهم أن تختار الأساليب التجريبية التي الأكثر ملاءمة للكشف والتحديد الكمي. وجود سوبسيلولار في الدماغ يسمح لعزل النفط الخام القابلة للذوبان البروتينات سيتوسوليك؛ بروتينات الغشاء؛ عضية-حدود البروتينات؛ وحتى البروتينات في هياكل سوبسيلولار الخاصة، مثل ال13،،من12مديرية الأمن العام14. مديرية الأمن العام هو مجال سوبسيلولار كثيفة ومنظمة تنظيماً جيدا في الخلايا العصبية التي بروتينات متشابك مركزة للغاية في وبالقرب من غشاء بوستسينابتيك12،،من1315. عزل مديرية الأمن العام مفيدة لدراسة البروتينات متشابك أثري في مديرية الأمن العام، منذ التغيرات الدينامية في وفرة ووظيفة مستقبلات الغلوتامات بوستسينابتيك والسقالات البروتينات والبروتينات في توصيل الإشارات في مديرية الأمن العام12 , 15 , 16 , 17 ترتبط اللدونة متشابك وسينابتوباثي لوحظت في العديد من الاضطرابات العصبية17،18. طريقة تجزئة سوبسيلولار سابقة تستخدم لتنقية مديرية الأمن العام تشارك عزلة الكسر تستعصي على الحل المنظفات من الكسر الخام غشاء المخ بالطرد المركزي التفاضلي السكروز التدرجات14، 19-ويتمثل التحدي الرئيسي بهذا الأسلوب التقليدي فإنه يتطلب كميات كبيرة من القوارض العقول14،19. إعداد القوارض 10-20 لعزل الكسر PSD كل معاملة يتطلب تكلفة كبيرة واستثمار الوقت وليست قابلة للتطبيق عمليا إذا كان هناك العديد من العلاجات.

للتغلب على هذا التحدي، ونحن قد تكيفت أسلوب أبسط مباشرة يعزل الكسر PSD، دون السكروز التدرج الطرد المركزي2120،، وتنقيحه لتكون قابلة للتطبيق لعزل مديرية الأمن العام من هيبوكامبي من فأر واحد الدماغ. لدينا أسلوب تجزئة PSD صغار غلة عن 30-50 ميكروغرام من البروتينات مديرية الأمن العام من هيبوكامبي 2، كافية لاستخدامها في عدة فحوصات الكيمياء الحيوية، بما في ذلك إيمونوبريسيبيتيشن وغرب النشاف. النشاف الغربية يوضح نجاح أسلوبنا لعزل مديرية الأمن العام بالكشف عن إثراء بوستسينابتيك كثافة البروتين 95 (مديرية الأمن العام-95) واستبعاد سينابتوفيسين ماركر presynaptic وقابل للذوبان بروتين هيولى α-توبولين. لدينا ECS التعريفي وطرق تجزئة PSD الصغيرة هي قابلة للتكيف بسهولة إلى مناطق أخرى في الدماغ القوارض وتوفر طريقة بسيطة نسبيا ويمكن الاعتماد عليها لتقييم آثار ECS على التعبير عن البروتينات مديرية الأمن العام.

Protocol

جميع الإجراءات التجريبية بما في ذلك المواد الحيوانية أقرتها لجنة الاستخدام في جامعة إيلينوي في اوربانا-الشمبانيا ورعاية الحيوانات المؤسسية. 1-الحفاظ على مستعمرة الفئران تتكاثر الفئران سبراغ داولي (انظر الجدول للمواد) والحفاظ عليها في الشروط القياسية بدوره ?…

Representative Results

استخدام الإجراءات المفصلة المقدمة هنا، صدمة كهربائية واحدة (55 ماجستير، 100 البقول/s ل 0.5 s) تسليمها عن طريق الإذن-كليب أقطاب الناجمة عن مرحلة غير متكرر مضبوطات منشط رمعي 4-5 في الفئران (الشكل 1أ-ب). تلقي الحادة ECS التعريفي 8 مجموع الجرذان وعرض المضبوطات …

Discussion

هنا، يمكننا وصف أسلوب الاستقراء ECS في الفئران التي يتسبب تحفيز نشاط الخلايا العصبية في هذه هيبوكامبي العالمية. ECS هو نموذج حيوان العلاج اليكتروكونفولسيفي، الذي يستخدم سريرياً لعلاج المخدرات اضطرابات الاكتئاب المقاوم للحرارة في البشر1،،من23…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

يشكر المؤلفون الدكتور إريك جيم بولتون للسماح لنا باستخدام أجهزة الطرد المركزي له لتجزئة والدكتور غراهام H. ديرينج في مختبر الدكتور ريتشارد لام هوجانير جامعة جون هوبكنز لتزويدنا بالبروتوكول الصغيرة لتجزئة مديرية الأمن العام.

Materials

Spargue-Dawley rat Charles River Laboratories ECS supplies
A pulse generator Ugo Bsile, Comerio, Italy 57800 ECS supplies
MilliQ water purifying system EMD Millipore Z00Q0VWW Subcellular fractionation supplies
Sucrose Em science SX 1075-3 Subcellular fractionation supplies
Na4O7P2 SIGMA-ALDRICH 221368 Subcellular fractionation supplies
Ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA) SIGMA-ALDRICH E9884 Subcellular fractionation supplies
HEPES SIGMA-ALDRICH H0527 Subcellular fractionation supplies
Okadaic acid TOCRIS 1136 Subcellular fractionation supplies
Halt Protease Inhibitor Thermo Scientific 78429 Subcellular fractionation supplies
NaVO3 SIGMA-ALDRICH 72060 Subcellular fractionation supplies
EMD Millipore Sterito Sterile Vacuum Bottle-Top Filters Fisher Scientific SCGPS05RE Subcellular fractionation supplies
Iris Scissors WPI (World Precision Instruments) 500216-G Subcellular fractionation supplies
30 mm tissue culture dish Fisher Scientific 08-772B Subcellular fractionation supplies
Glass homogenizer and a Teflon pestle VWR 89026-384 Subcellular fractionation supplies
1.7 mL microcentrifuge tube DENVILLE SCIENTIFIC INC.  C2170 (1001002) Subcellular fractionation supplies
Sorvall Legend XT/XF Centrifuge  Thermo Fisher 75004521 Subcellular fractionation supplies
Pierce BCA Protein Assay Reagent A, 500 mL Thermo Fisher #23228 Western blot supplies
Pierce BCA Protein Assay Reagent B, 25 mL Thermo Fisher #1859078 Western blot supplies
SDS-polyacrylamide gel (SDS-PAGE) BIO-RAD #4561086S Western blot supplies
Running Buffer Made in the lab Western blot supplies. 
Mini-PROTEAN Tetra Vertical Electrophorsis Cell for MiniPrecast Gels, 4-gel BIO-RAD #1658004 Western blot supplies
Polyvinyl difluoride (PVDF) membrane  Milipore IPVH00010 Western blot supplies
Transfer Buffer Made in the lab Western blot supplies. 
Tris-base Fisher Scientific BP152-1 Western blot supplies
Glycine Fisher Scientific BP381-5 Western blot supplies
Sodium dodecyl sulfate SIGMA-ALDRICH 436143 Western blot supplies
Methanol  Fisher Scientific A454-4 Western blot supplies
Triton X-100 Fisher Scientific BP151-500 detergent for PSD isolation
Mini Trans-Blot Module  BIO-RAD #1703935 Western blot supplies
Nonfat instant dry milk Great value Western blot supplies
Multi-purposee rotator  Thermo Scientific Model-2314 Western blot supplies
Hyblot CL Autoradiography Film DENVILLE SCIENTIFIC INC.  E3018 (1001365) Western blot supplies
Enhanced chemifluorescence substrate  Thermo Scientific 32106 Western blot supplies
a Konica SRX-101A film processor KONICA MINOLTA SRX-101A Western blot supplies
Name of Antibody
PSD-95 Cell Signaling #2507 Antibody dilution = 1:500-1000, time = 9 – 12 h, Reaction Temperature = 4 °C, Host Species = Rabbit
Synaptophysin Cell Signaling #4329 Antibody dilution = 1:500-1000, time = 9 – 12 h, Reaction Temperature = 4 °C, Host Species = Rabbit
alpha-Tubulin Santacruz SC-5286 Antibody dilution = 1:500-1000, time = 9 – 12 h, Reaction Temperature = 4 °C, Host Species = Mouse
GluN2B Neuromab 75-097 Antibody dilution = 1:500-1000, time = 9 – 12 h, Reaction Temperature = 4 °C, Host Species = Mouse
GluA2 Sigma-aldrich Sab 4501295 Antibody dilution = 1:500-1000, time = 9 – 12 h, Reaction Temperature = 4 °C, Host Species = Rabbit
STEP Santacruz SC-23892 Antibody dilution = 1:200-500, time = 9 – 12 h, Reaction Temperature = 4 °C, Host Species = Mouse
Peroxidas AffiniPure Donkey Anti-Mouse IgG (H+L) Jackson ImmunoReserch laboratory 715-035-150 Antibody dilution = 1:2000-5000, time = 1 h, Reaction Temperature = RT, Host Species = Donkey
Peroxidas AffiniPure Donkey Anti-Rabbit IgG (H+L) Jackson ImmunoReserch laboratory 711-035-152 Antibody dilution = 1:2000-5000, time = 1 h, Reaction Temperature = RT, Host Species = Donkey

References

  1. Dierckx, B., Heijnen, W. T., van den Broek, W. W., Birkenhager, T. K. Efficacy of electroconvulsive therapy in bipolar versus unipolar major depression: a meta-analysis. Bipolar Disord. 14 (2), 146-150 (2012).
  2. McClintock, S. M., et al. Multifactorial determinants of the neurocognitive effects of electroconvulsive therapy. J ECT. 30 (2), 165-176 (2014).
  3. Jelovac, A., Kolshus, E., McLoughlin, D. M. Relapse following successful electroconvulsive therapy for major depression: a meta-analysis. Neuropsychopharmacology. 38 (12), 2467-2474 (2013).
  4. Inta, D., et al. Electroconvulsive therapy induces neurogenesis in frontal rat brain areas. PLoS One. 8 (7), 69869 (2013).
  5. Segi-Nishida, E., Warner-Schmidt, J. L., Duman, R. S. Electroconvulsive seizure and VEGF increase the proliferation of neural stem-like cells in rat hippocampus. Proc Natl Acad Sci USA. 105 (32), 11352-11357 (2008).
  6. Zetterstrom, T. S., Pei, Q., Grahame-Smith, D. G. Repeated electroconvulsive shock extends the duration of enhanced gene expression for BDNF in rat brain compared with a single administration. Brain Res Mol Brain Res. 57 (1), 106-110 (1998).
  7. Altar, C. A., et al. Electroconvulsive seizures regulate gene expression of distinct neurotrophic signaling pathways. J Neurosci. 24 (11), 2667-2677 (2004).
  8. Ploski, J. E., Newton, S. S., Duman, R. S. Electroconvulsive seizure-induced gene expression profile of the hippocampus dentate gyrus granule cell layer. J Neurochem. 99 (4), 1122-1132 (2006).
  9. Pusalkar, M., et al. Acute and Chronic Electroconvulsive Seizures (ECS) Differentially Regulate the Expression of Epigenetic Machinery in the Adult Rat Hippocampus. Int J Neuropsychopharmacol. 19 (9), (2016).
  10. Jang, S. S., Royston, S. E., Lee, G., Wang, S., Chung, H. J. Seizure-Induced Regulations of Amyloid-beta, STEP61, and STEP61 Substrates Involved in Hippocampal Synaptic Plasticity. Neural Plast. 2016 (2123748), 1-13 (2016).
  11. Limoa, E., et al. Electroconvulsive shock attenuated microgliosis and astrogliosis in the hippocampus and ameliorated schizophrenia-like behavior of Gunn rat. J Neuroinflammation. 13 (1), 230 (2016).
  12. Vinade, L., et al. Affinity purification of PSD-95-containing postsynaptic complexes. J Neurochem. 87 (5), 1255-1261 (2003).
  13. Dosemeci, A., Tao-Cheng, J. H., Vinade, L., Jaffe, H. Preparation of postsynaptic density fraction from hippocampal slices and proteomic analysis. Biochem Biophys Res Commun. 339 (2), 687-694 (2006).
  14. Westmark, P. R., Westmark, C. J., Jeevananthan, A., Malter, J. S. Preparation of Synaptoneurosomes from Mouse Cortex using a Discontinuous Percoll-Sucrose Density Gradient. J Vis Exp. (3196), e1-e9 (2011).
  15. Sheng, M. Molecular organization of the postsynaptic specialization. Proc Natl Acad Sci USA. 98 (13), 7058-7061 (2001).
  16. Sheng, M., Hoogenraad, C. C. The postsynaptic architecture of excitatory synapses: a more quantitative view. Annu Rev Biochem. 76, 823-847 (2007).
  17. Ehrlich, I., Malinow, R. Postsynaptic density 95 controls AMPA receptor incorporation during long-term potentiation and experience-driven synaptic plasticity. J Neurosci. 24 (4), 916-927 (2004).
  18. Schnell, E., et al. Direct interactions between PSD-95 and stargazin control synaptic AMPA receptor number. Proc Natl Acad Sci USA. 99 (21), 13902-13907 (2002).
  19. Bermejo, M. K., Milenkovic, M., Salahpour, A., Ramsey, A. J. Preparation of synaptic plasma membrane and postsynaptic density proteins using a discontinuous sucrose gradient. J Vis Exp. (91), e51896 (2014).
  20. Tan, H. L., Queenan, B. N., Huganir, R. L. GRIP1 is required for homeostatic regulation of AMPAR trafficking. Proc Natl Acad Sci USA. 112 (32), 10026-10031 (2015).
  21. Diering, G. H., Gustina, A. S., Huganir, R. L. PKA-GluA1 coupling via AKAP5 controls AMPA receptor phosphorylation and cell-surface targeting during bidirectional homeostatic plasticity. Neuron. 84 (4), 790-805 (2014).
  22. Luttjohann, A., Fabene, P. F., van Luijtelaar, G. A revised Racine’s scale for PTZ-induced seizures in rats. Physiol Behav. 98 (5), 579-586 (2009).
  23. Chiu, K., Lau, W. M., Lau, H. T., So, K. -. F., Chang, R. C. -. C. Micro-dissection of Rat Brain for RNA or Protein Extraction from Specific Brain Region. J Vis Exp. (7), e269 (2007).
  24. Hagihara, H., Toyama, K., Yamasaki, N., Miyakawa, T. Dissection of Hippocampal Dentate Gyrus from Adult Mouse. J Vis Exp. (1543), e1-e6 (2009).
  25. Kim, M. J., et al. Synaptic accumulation of PSD-95 and synaptic function regulated by phosphorylation of serine-295 of PSD-95. Neuron. 56 (3), 488-502 (2007).
  26. Won, S., Incontro, S., Nicoll, R. A., Roche, K. W. PSD-95 stabilizes NMDA receptors by inducing the degradation of STEP61. Proc Natl Acad Sci USA. 113 (32), 4736-4744 (2016).
  27. Qu, L., Akbergenova, Y., Hu, Y., Schikorski, T. Synapse-to-synapse variation in mean synaptic vesicle size and its relationship with synaptic morphology and function. J Comp Neurol. 514 (4), 343-352 (2009).
  28. Delaney, A. J., Sedlak, P. L., Autuori, E., Power, J. M., Sah, P. Synaptic NMDA receptors in basolateral amygdala principal neurons are triheteromeric proteins: physiological role of GluN2B subunits. J Neurophysiol. 109 (5), 1391-1402 (2013).
  29. Zhang, Y., et al. The tyrosine phosphatase STEP mediates AMPA receptor endocytosis after metabotropic glutamate receptor stimulation. J Neurosci. 28 (42), 10561-10566 (2008).
  30. Braithwaite, S. P., et al. Regulation of NMDA receptor trafficking and function by striatal-enriched tyrosine phosphatase (STEP). Eur J Neurosci. 23 (11), 2847-2856 (2006).
  31. Paul, S., Nairn, A. C., Wang, P., Lombroso, P. J. NMDA-mediated activation of the tyrosine phosphatase STEP regulates the duration of ERK signaling. Nat Neurosci. 6 (1), 34-42 (2003).
  32. Malberg, J. E., Eisch, A. J., Nestler, E. J., Duman, R. S. Chronic antidepressant treatment increases neurogenesis in adult rat hippocampus. J Neurosci. 20 (24), 9104-9110 (2000).
  33. Kandratavicius, L., et al. Animal models of epilepsy: use and limitations. Neuropsychiatr Dis Treat. 10, 1693-1705 (2014).
  34. Loscher, W. Animal models of epilepsy for the development of antiepileptogenic and disease-modifying drugs. A comparison of the pharmacology of kindling and post-status epilepticus models of temporal lobe epilepsy. Epilepsy Res. 50 (1-2), 105-123 (2002).
  35. Stromgren, L. S., Juul-Jensen, P. EEG in unilateral and bilateral electroconvulsive therapy. Acta Psychiatr Scand. 51 (5), 340-360 (1975).
  36. Abrams, R., Volavka, J., Fink, M. EEG seizure patterns during multiple unilateral and bilateral ECT. Compr Psychiatry. 14 (1), 25-28 (1973).
  37. Duman, R. S., Vaidya, V. A. Molecular and cellular actions of chronic electroconvulsive seizures. J ECT. 14 (3), 181-193 (1998).
  38. Andre, V., Ferrandon, A., Marescaux, C., Nehlig, A. Electroshocks delay seizures and subsequent epileptogenesis but do not prevent neuronal damage in the lithium-pilocarpine model of epilepsy. Epilepsy Res. 42 (1), 7-22 (2000).
  39. Sinclair, D., et al. Effects of sex and DTNBP1 (dysbindin) null gene mutation on the developmental GluN2B-GluN2A switch in the mouse cortex and hippocampus. J Neurodev Disord. 8 (14), 1-19 (2016).
  40. Sakaida, M., et al. Electroconvulsive seizure-induced changes in gene expression in the mouse hypothalamic paraventricular nucleus. J Psychopharmacol. 27 (11), 1058-1069 (2013).
  41. Hu, J. H., et al. Homeostatic scaling requires group I mGluR activation mediated by Homer1a. Neuron. 68 (6), 1128-1142 (2010).
  42. Blackstone, C. D., et al. Biochemical characterization and localization of a non-N-methyl-D-aspartate glutamate receptor in rat brain. J Neurochem. 58 (3), 1118-1126 (1992).
  43. Blackstone, C. D., Levey, A. I., Martin, L. J., Price, D. L., Huganir, R. L. Immunological detection of glutamate receptor subtypes in human central nervous system. Ann Neurol. 31 (6), 680-683 (1992).
  44. Lau, L. F., et al. Interaction of the N-methyl-D-aspartate receptor complex with a novel synapse-associated protein, SAP102. J Biol Chem. 271 (35), 21622-21628 (1996).
  45. Braithwaite, S. P., Paul, S., Nairn, A. C., Lombroso, P. J. Synaptic plasticity: one STEP at a time. Trends Neurosci. 29 (8), 452-458 (2006).
  46. Jang, S. S., et al. Regulation of STEP61 and tyrosine-phosphorylation of NMDA and AMPA receptors during homeostatic synaptic plasticity. Mol Brain. 8 (1), 55 (2015).

Play Video

Cite This Article
Jang, S., Jeong, H. G., Chung, H. J. Electroconvulsive Seizures in Rats and Fractionation of Their Hippocampi to Examine Seizure-induced Changes in Postsynaptic Density Proteins. J. Vis. Exp. (126), e56016, doi:10.3791/56016 (2017).

View Video