Summary

쥐의 전체 두께 피부 이식

Published: January 02, 2017
doi:

Summary

쥐의 전체 두께 피부 이식은 동종 설정에 거부 반응을 연구하는 잘 확립 된 모델이다. > C57BL / 6 전층 피부 이식 – 여기, 우리는 BALB / C를 수행에 관련된 각 단계의 튜토리얼을 제공합니다.

Abstract

쥐의 전체 두께 피부 이식은 동종 반응과 이식 거부 반응을 연구하는 잘 설립 생체 내 모델입니다. 인간에게 제한된 응용 프로그램에도 불구하고, 마우스의 피부 이식 널리 이식 연구에 이용되고있다. 절차 배우고 수행하는 것이 용이하고, 섬세한 미세 수술 기술도 광범위한 훈련을 필요로하지 않는다. 또한,이 모델의 이식 거부는 매우 재현 면역 반응에서 발생하고 쉽게 직접 검사 및 촉진에 의해 모니터링된다. 또한, 기증자 일치 또는 타사 피부 이식 2 차 피부 이식은 다른 기증자 별 허용 오차를 평가하는 복잡하지 않은 방법으로 더 복잡한 이식 모델에서 수행 할 수 있습니다. 합병증은 낮으며 시술 후 마취 과다 복용 또는 호흡 곤란으로 제한 일반적이다. 이식 실패는 한편, GR의 불량한 제조의 결과로서 통상적으로 발생그래프트 침대에서 후미, 잘못된 위치, 또는 붕대의 부적절한 배치. 이 글에서, 우리는 생쥐에서 전층 피부 이식을위한 프로토콜을 제시하고 성공적인 수속에 필요한 중요한 단계를 설명합니다.

Introduction

장기 이식은 말기 장기 부전 환자에 대한 선택의 치료이며, 결과는 수술 절차 및 면역 억제 프로토콜의 발전에 현저하게 향상되었습니다. 그러나, 장기간의 면역 억제는 상당한 부작용과 연관 내성을 증진 새로운 전략의 개발은 현대 이식 연구의 목표로 남아있다.

많은 동물 모델은 이식 거부 반응의 메커니즘을 연구하는 면역 억제가 이식 거부 반응을 방지하기위한 장기 공차 1-3 촉진 접근 테스트 이식에 기초 연구 개발되어왔다. 마우스 모델에 의한 진단 및 치료 항체와 잘 정의 된 근친과 유전자 변형 종자의 독점과 광대 한 가용성 면역 학적 연구의 주류가되었다. 피부 이식은 특수 미세 수술 기술을 필요로 할 수없는 간단한 절차입니다쉽게 수술 후 모니터링 될 수있다. 함께 찍은, 마우스 피부 이식은 이식 거부 4,5 동안 항원 전달 세포 인신 매매, 조직 파괴를 포함하여 동종 응답에 관련된 여러 측면을 연구하는 뛰어난 도구가되고있다.

여기서는 마우스 모델을 이용하여 전체 두께 피부 이식을위한 단계별 과정을 보여, 우리는 이식 된 피부의 성공적인 생착에 필요한 중요한 단계를 설명한다.

Protocol

모든 절차는 관리 및 국립 보건 연구소 (NIH)의 실험 동물의 사용에 대한 가이드에 따라 실시하고, 존스 홉킨스 대학 동물 관리 및 사용위원회 (JHUACUC)에 의해 승인되었다. 구체적인 절차는 승인 ACUC 프로토콜 MO13M292 및 MO13M370 하에서 수행 하였다. 1. 기증자 피부 수확 (- 마우스 콘을 통해 2 % 1에서 유지 보수, 4 %에서 유도 기화기) 이소 플루 란과 기증자 마우스를 마취. ?…

Representative Results

받는 사람 마우스의 붕대의 위치는 절차의 중요한 단계입니다. 피부 이식은 어깨, 고관절, 척추 (그림 1) 사이에,받는 사람 트렁크에 위치한다. 붕대 접혀 거즈와 두 개의 플라스틱 접착 붕대의 조합으로 이루어집니다. 받는 사람 마우스는 붕대의 중심에 거즈를 통해 아래로 이식으로 배치됩니다. 두 곡선의 마이크로 핀셋을 사용하여, 붕대의 하단부는 제 당겨…

Discussion

토끼와 생쥐에서 다음 인간 연구에서 제 메다에 의해 소개 된 이후, 피부 이식은 동종 면역 반응 6,7의 연구를위한 귀중한 모델이되고있다. 이 논문에서는 상하 다시 피부를 이용한 대규모의 비 혈관 전층 피부 이식 모델을 제시한다. 꼬리 피부 또는 이식 조직 공급원으로서 마우스 귀 피부 사용을 포함하는 다양한 다른 방법은, 8,9까지보고되고있다. 이러한 모델은 단순 기술의 뚜?…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

이 작품은 NIH 교부금 R01AI077610에 의해 투자되었다.

Materials

Straight micro forceps  Sigma F4017
Curved micro forceps  Aesculap BD333R
Curved Stevens tenotomy scissors  Aesculap BC905R
Mayo dissecting  scissors Sigma S3146
Micro needle holder Aesculap BM563R
Sterile gauze Covidien 441218
6-0 Nylon suture  MWI 31849
Plastic Strips Band-Aid Johnson & Johnson Obtained from pharmacy
10 cm Petri dish Fisherbrand FB0875712
PBS Quality Biological 119069131
Buprenorphine DEA Number required; Obtained from hospital pharmacy
Enrofloxacin Bayer Health Care 186599

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Cite This Article
Cheng, C., Lee, C., Fryer, M., Furtmüller, G. J., Oh, B., Powell, J. D., Brandacher, G. Murine Full-thickness Skin Transplantation. J. Vis. Exp. (119), e55105, doi:10.3791/55105 (2017).

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