JoVE Journal > Cancer Research
Summary
Abstract
Introduction
Protocol
Results
Discussion
Disclosures
Acknowledgements
Materials
References
Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.
癌症研究

Köpek ve Kedilerde Tümör Tedavisinde Elektrokemoterapi İşletim Prosedürleri

Published: October 24, 2016
doi:
10.3791/54760
, , , , ,
1Clinic for Surgery and Small Animals, Veterinary Faculty,University of Ljubljana, 2Department of Experimental Oncology,Institute of Oncology Ljubljana, 3Faculty of Health Sciences,University of Primorska, 4IPBS (Institut de Pharmacologie et de Biologie Structurale),CNRS, 5IPBS (Institut de Pharmacologie et de Biologie Structurale),Université de Toulouse

Summary

Electrochemotherapy is the local treatment of solid tumors. The main mechanism is electroporation-mediated permeabilization of the tumor cells’ membrane which enables increased internalization of cytostatics like bleomycin and cisplatin. Thus, antitumor effectiveness is potentiated at the site of the application of electric pulses to the tumors.

Abstract

Elektrokemoterapi (ECT) farklı histolojisi katı tümörlerin tedavi edilmesi için kullanılan lokal bir yaklaşımdır. Bu mekanizma, "Elektroporasyon" ile hücre membran geçirgenliği dayanır. hücre "elektroporasyon" elde etmek için, elektrik darbeleri bir jeneratör tarafından üretilen ve elektrot kullanarak, hedef dokuya ulaştırılmaktadır. Elektroporasyon kendi hücre zarı geçemediği hücrelerine sitostatik ilaçlar gibi, molekülleri yerleştirilebilir için kullanılan fiziksel bir yöntemdir. Elektrokemoterapi olarak, şu anda, sisplatin ve bleomisin klinikte kullanılmaktadır. Elektrokemoterapi antitümör etkinliği köpek mast hücre% 100 tam yanıt kadar, örneğin 2 cm'den küçük 3 elde edilmiştir tümörler yüksektir. Buna ek olarak, Elektrokemoterapi çalışmaz tümörlerin tedavisi için kullanılabilmektedir. Elektrokemoterapi önemli özelliklerinden biri de bir kerelik tedavi olarak etkili olabilir kibir tek. Bununla birlikte, hata veya tümöre kısmi cevap durumunda eşit ya da geliştirilmiş etkinliği ile pek çok kez tekrar edilebilir. Elektrokemoterapi önce, insan ve veteriner onkolojide çeşitli histolojisi ve kutan ve subkutan tümör için standart bir tedavidir. Ayrıca, köklü tümörler için Elektrokemoterapi istismar çeşitli klinik çalışmalar-devam bulunmaktadır.

Introduction

ECT farklı histolojisi tümörlerin tedavisi için bir lokal ablasyon tekniktir. nedeniyle ilacın tümör ya da damardan enjeksiyon sonrası tümör çevresindeki cilt üzerine elektrik darbeleri doğrudan taşınması ile başlatıldığı değiştirilen hücre membranı geçirgenliğine hücrelerde artan ilaç birikiminin bir sonucu ilaçla indüklenmiş hücre ölümü, ablasyon sonuçları. ECT ana mekanizması, hücre membranı electropermeabilization (elektroporasyon) 1,2 ile artan hücre içi ilaç birikimi sitostatik ilaçların etkinliğini arttırmaktır. bleomisin ve sisplatin, zayıf zar nüfuziyeti olan hidrofilik ilaçlar: Elektroporasyon iki sitostatik bir yüksek ilaç alımını neden olur. Nedeniyle elektrik akımının uygulanması yerinde bleomisin ve sisplatinin artan sitotoksisite, düşük ilaç dozları iyi bir anti-tümör etkinliği için gerekli olan ilaçların dolayısıyla hiç veya çok az sistemik yan etkiler Observ olan edilirEd 3. EKT bir diğer özelliği vasküler kilidi, yani. Öncelikle sonuçlanan bir tümör antivasküler etkisi, eylem kesintiye bir vasküler ikincisi kan tümör içindeki akışını ve içindeki Sitostatiklerin dolayısıyla tutma ve azalmış yani., Endotel hücreleri doğrudan öldürme küçük kan damarlarının sekonder tümör hücre ölümüne 4-6 yol açar. ECT, tümör çevresi dökülme tümör antijenine bir bağışıklık tepkisini ortaya çıkaran olarak ECT antitümör etkinliği üçüncü mekanizması bağışıklık sisteminin aktivasyonudur. Bağışıklık sisteminin katılımı tümör 7 tamamen ortadan kaldırılması için çok önemlidir.

ECT nesnel yanıtlar 3% 80'e varan sergiler olarak EKT zaten deri ve deri altı tümörleri için standart bir tedavi olarak kullanılmaktadır insan onkoloji, büyük potansiyel göstermiştir. Ayrıca, EKT beyinde tümör metastazları tedavi çeşitli klinik çalışmalarda kullanılır <s> 8, kemik 9 ve karaciğer 10 kadar. Veteriner onkolojide klinik çalışmalar zaten köpekler, 11, 12, kedi 13 ve atlar 14 kutan ve subkutan tümörlerin tedavi, yukarı% 80'inde, ECT tedavisi sonuçları objektif tepkiler, uzun ömürlü olduğunu göstermiştir. Anti-tümör etkinliği, tümör büyüklüğüne bağlıdır ve daha büyük tümörler 15 daha küçüktür 2 cm3 cevap iyi tümörler.

Ayrıca, köpeklerde mast hücre tümörlerin tedavisinde ECT ile cerrahi karşılaştıran bir çalışma, cerrahi tam yanıt,% 50, ECT cerrahi eşdeğer tedavi 11 gösteren sonuçlanırken ECT ile tedavi komple tepkiler% 70 ile sonuçlandığını göstermiştir. Sahipleri cerrahi muvafakat ya da yok Ayrıca, EKT özellikle bu durumlarda, cerrahi tedavi katı tümörleri tedavi etmek için alternatif bir yöntem temsil tümörler çoğunlukla nedeniyle net marjları ile tüketim zordur eğer onlarınKonumu (örneğin, büyük damarlar, anal bölge vb baş veya bacak tümörleri, infiltre). Bu yazının amacı, güvenli ve uygun Kedi ve köpeklerde deri ve deri altı tümörleri tedavi etmek için elektrik darbeleri uygulama ile birlikte sisplatin ve bleomisin kullanımı için EKT veren talimatların çalışma usulleri belirlemektir.

Protocol

Bu protokol Tarım, Orman ve Gıda Bakanlığı Etik Komitesi tarafından onaylanmış ve yönergeleri takip edildi. protokol 80'den fazla köpek ve 20 kedi üzerinde doğrulanmıştır. Not: ECT tedavisinden sisplatin veya bleomisin ve elektrik darbeleri, tümör nodüllerinin maruz uygulanmasından oluşmaktadır. 1. Hasta Seçimi NOT: Hasta seçimi hastanın bu tedaviden fayda uygun olup olmadığını belirlemek için uygulayıcısı sağlar. Hastanın öyküsü (tekrarlama yaş, cins, cinsiyet ve eş zamanlı hastalıkların varlığı, tümör tipi, zamanla tümörün gelişimi, önceki tedaviler ve sonuçları, nüks ve hız hakkında genel verileri değerlendirmek, bir successfulness hakkında sahibinin beklentileri tedavi). Hastanın fiziksel muayene m için ayrıntılı olarak tümörün değerlendirirpotansiyel invaziv tümör sunulursa geniş marjları (büyüklüğü hakkında karar tedavi: AKE olası klinik ayırıcı tanı ve tedavi alanını belirlemek amacıyla histoloji değerlendirmesi için sitoloji ve olası doku biyopsisi için ince bir iğne aspirat gerçekleştirin 1 cm marjı tedavi edilmelidir tümör, örneğin, ≤ 1 cm 2r mast hücreli tümör aynı tip başka bir tedavi için önerileri doğrultusunda tedavi marjları; r – yarıçap). bir tedavi yaklaşımı hazırlamak amacıyla nodüllerin sayısını ve boyutunu değerlendirir. Genel muayene Hastalığın evreleme yapmak ve kontrol etmek için tam bir genel muayene uygulamak: Hastanın herhangi bir kronik enfeksiyon öyküsü varsa ya da (belli bir alanda epidemiyolojisi göre), tedaviyi engeller olabilir başka hiçbir eşzamanlı hastalık varsa hematolojik veya coagulat değiştirebilir hastalığı, bağışıklık aracılıiyon değişiklikleri (spesifik testler) hayvan hasta sisplatin duyarlılığı varsa, derin Teskin ve / veya genel anestezi bir dizi dayanabilmesi ise (standart doz 60-70 mg / m 2 vücut yüzey alanı / 21 d) ya da bleomisin ya da zaten 400.000 IU / m 2 'yi aşan bleomisin kümülatif doz aldı. Tümör tipine göre olası metastazları kontrol etmek için tanısal görüntüleme teknikleri (karın toraks ve ultrason muayenesinin radyografi) kullanın. 2. Laboratuar Analiz Kan tahlili Bir biyokimya kan üre nitrojen panelinde (BUN), kreatinin, alanin-aminotransferaz (ALT), alkalin fosfataz (AF) ve belirlemek amacıyla gelişmiş kronik böbrek ve karaciğer hastalıkları ve mümkün olan en sık paraneoplastik sendromlara dışlamak için kalsiyum ile analizleri tam hematoloji gerçekleştirin bir ef olabilir klinik evreprognoz üzerine fect. Ek spesifik kan analizi yapın: Hasta potansiyel pıhtılaşma yeteneği değişiklikleri değiştirebilir herhangi bir ilaç verilirse, koagülasyon profili kontrol edin. invaziv tedavi (iğne elektrotlar) kullanıyorsanız, trombosit sayısını kontrol edin; trombosit sayısı> 100 olmalıdır veya durumda o <100, pıhtılaşma profili (PT, APTT, fibrinojen, D-dimer) normal gerektiğidir. neoplastik hastalık ve hastanın klinik durumuna göre özel durumlarda toplam protein, albümin, fosfor, sodyum (Na), potasyum (K), klorür (Cl) ve lipaz konsantrasyonu kontrol edin. Tümör (ler) histolojik analiz sitoloji tan daha önce gerçekleştirilmiştir, eğer Histoloji analizi gerekli değildir. Histolojik grade önemli bir prognostik faktördür bazı tümör tiplerinin durumunda (örneğin, mast hücreli tümörler) hematoksilen ve eozin sta gerçekleştirmekadencilik 16. NOT: biyopsi (insizyonel veya "yumruk") aynı ziyaret sırasında EKT öncesinde yapılabilir. Herhangi bir durumda, tümör tipi teşhis etmek ve iyi klinik uygulama. NOT: Olgu tamamen hayvanın sahibi gerekli olan kapsamlı bir tartışma ve açıklama değerlendirildikten sonra. klinik sonuçlar açısından EKT beklenen ne olabilir EKT ve ne sahibine açıklayın. Genel anestezi veya derin sedasyon, toplam tedavi süresi, tedavi maliyeti, nüks olasılıkları altında EKT oturum sayısını: sahibi ile tedavi kursu tartışın. Hasta aslında uygun olup olmadığını, EKT bir klinik çalışmada içinde hasta dahil durumunda sahibinin yazılı onayını alın. Tedavi Şekli ve 3. Tercih NOT: Köpekler sisplatin ve bleomisin kullanmak EKT için de. sisplatin kedilerde kontrendikedir olarak kedilerde EKT, sadece bleomisin kullanın. <li> Ayrı ayrı tümör davranın. konumu ve her nodülün boyutu ve tedavi protokolünü anahat nodüllerin sayısını belirler. Formül V = ab²π / 6 ( "a" büyük tümör nodül çapı ve "b", "a" dik tümör nodül çapı) veya V = abcπ / 6 ( "seçeneğini kullanarak tümör nodüllerinin hacmini hesaplamak bir "," B "ve" C "), tümör nodülü üç dikey çapları. Çalışma Şekli 4. Choice Elektrotların seçimi NOT: elektrot konfigürasyonu dokusunda elektrik alan dağılımını etkiler gibi optimal elektrot tipini seçmek önemlidir. elektrodun iki tür kullanılır: plaka ve iğne elektrotlar. Plaka elektrotlar paralel paslanmaz çelik plakalar: elektrotlar arasındaki iç mesafe tümörün büyüklüğü ve elektrik darbeleri jeneratörünün kapasitesine bağlıdır. Genellikle mesafe olacakelektrotları arasını 6-8 mm'dir. İğne elektrotlar satır (paralel dizi) veya altıgen geometride düzenlenebilir. altıgen elektrod, merkezi bir iğne ve dairesel dizi içinde 6 iğneler vardır. baklagiller dairesel bir düzenek ve bunların, merkezi bir arasında elektrotları arasında uygulanır. baklagiller elektrot çifti arasında her iki yönde uygulanır. Tümör nodülün derinliğine göre elektrotun türünü seçin ve işlenmiş alan istenilen bütün uygun elektroporasyon sağlamak. Belirli hedef dokuya göre olan elektrotlar seçin. Genel olarak, her iki tür elektrod tedavisi için de kullanılabilir. Seçme ve sisplatin veya bleomisin hazırlanması Not: ECT sisplatin veya bleomisin veya bleomisin ve elektrik darbeleri, tümör nodüllerinin maruz intravenöz intratümöral oluşur. Uygun bir sitostatik ve uygulama yolunu seçin. ci çözülür1 mg / ml'lik bir konsantrasyonda damıtılmış su içinde bir toz, olarak elde halinde splatin (sis-diamminedichloroplatinum II), (aksi farmasötik hazırlanmış çözeltiler kullanılabilir). intratümöral Sisplatin verin. 3 mg / ml'lik bir konsantrasyonda, bir fizyolojik tuzlu su içinde bleomisin çözülür ve tümör içine ya da damar içine vermektedir. Anestezi NOT: İşletim yöntemi bağlı olarak (Tablo 1) derin sedasyon veya genel anestezi kullanılabilir. Amerikan Anestezi Derneği '(ASA), çünkü olası paraneoplastik sendromlar tümör tipine göre fiziksel durum sınıflamasına göre ve hastayı değerlendirir. derin sedasyon medetomidini (0.08 mg / kg) veya köpeklerde butorfanol tartarat (0.1 mg / kg) ile çift kombinasyon medetomidini (0.025 mg / kg) kullanın veya belirli hastanede derin sedasyon için standart prosedürlerin takip edin. Genel anestezi <li> asepromazin (0.02 mg / kg) ve metadon (2 mg / kg) ile premedikasyon. Otuz dakika sonra, tiopental (5 mg / kg) ya da propofol (1 mg / kg) ile birlikte genel anestezi neden olur. endotrakeal tüp yerleştirin ve bir T-parçası anestezi devresi ile teslim oksijen izofluran ile anestezi korumak. Anestezi bir non-steroid analjetik ilaç (örneğin, karprofen 2-4 mg / kg), tek bir doz ile 10 ml / kg / saat ve analjezi bir oranda Hartmann'ın solüsyon ile sıvı destek tedavisi, kullanım esnasında. anestezi altında iken kuruluğunu önlemek için göz merhemi kullanın. sternal yatma yeterli bilinç kavuşur kadar tedaviden sonra, hasta denetlemek. yaklaşık 2 ila 4 saat boyunca klinik hasta tutun. NOT: Belirli hastanede genel anestezi için standart prosedürler de izlenebilir. Çalışma ortamı NOT: Personel işletim eğitimli EKT operatörleri (DVM), anestezist ve yardımcıları. <li> ECT derin sedasyon altında yapılır herhangi bir ambulans odası ya da genel anestezi izin herhangi bir cerrahi oda kullanın. Sedasyon ve / veya genel anestezi kullanımı anestezi için prosedürlere göre gerekli tüm ekipman için. ECT prosedürü için malzemeler listesinde gerekli tüm malzemeleri görmek. Operatör ve çevresindeki personel koruma Not: antineoplastik ilaçlar derinin damlacık maruz nadiren akut sorunlara neden olmaktadır. Sisplatin ve bleomisin sağlam deri yoluyla absorbe edilmez. Sisplatin sadece tahrişe neden olabilir. Firma nodüller veya tümörler enjekte ederken Sisplatin ve bleomisin sızıntı meydana gelebilir. İğne batması durumunda, su bolluğu ile yıkayın ve standart tıbbi uygulamaya göre yara ilgileneceğim. maskeleri ve eldiven ile operatörü ve çevresindeki yardımcıları koruyun. sisplatin veya bleomisin çözeltisine cilt maruz kalma durumunda, hemen suyla bol suyla durulayın. </li> Varsa, antikanser ilaç kullanımı hakkında yerel düzenlemelere uygun bir kalite güvence programına göre biyogüvenlik önlemlerinin kurmak. Elektrik impuls jeneratörler Not: elektrik darbeleri uygulamaları elektrik darbeleri jeneratör ile gerçekleştirilebilir. Genellikle, cihaz entegre yazılım ve önceden tasarlanmış elektrik darbeleri seçmek için dokunmatik ekran arayüzü ile bir kare dalga darbe jeneratörü olduğunu. Bir elektrik kablosu ile jeneratörüne bağlı bir nabız aktive düğmesi ile elde tutulan bir elektrot tutucu ile donatılmıştır. elektrik darbeleri teslimat bir ayak anahtarı tarafından kontrol edilebilir. elektrik darbeleri jeneratör Avrupa Birliği standartlarına uygun olmalıdır: 2006/95 / CE elektromanyetik uyumluluk ve uyumlu olmalıdır ilişkin 12/15/2004 belirli voltaj sınırları içinde kullanılan elektronik malzeme ile ilgili 12/12/2006, 2004/108 / CE gelen FDA'nın düzenlemeler. elektrik darbeleri uygulama Prosedür NOT: Thelektrik darbeleri e uygulaması sisplatin veya bleomisin, veya bleomisin intravenöz intratümöral izler. tümör içine sitostatik uygulanırken sızıntıyı önlemek için yavaş uygulanmalıdır. intravenöz için yönetim sitostatik yaklaşık 30 sn süren bir bolus uygulanmalıdır. Bir su bazlı jel deri ve elektrotlar her iki plaka veya iğne arasında iyi bir temas sağlamak için ve daha az heterojen elektrik alanı dağılımı elde etmek için kullanılır. Jellerin iletkenliği 0.5 ila 1 S / m 17,18 arasında olmalıdır. kullanılan jel elektrik iletkenliği 0,5 S / m oldu. Plâka elektrotlar Tümör aralarında kapsanmaktadır şekilde yerleştirilmelidir. Ayrıca, elektrik palslarının tatbiki dikey yönde iki kez yapılmalıdır elektrik alanının daha iyi dağılmasını sağlamak için. Tümör elektrotlar arasındaki mesafeden daha büyük olması durumunda, elektrot uygulanması yıldız olmalıdırTümörün merkezine doğru ve ilerleme (emniyet marjı dahil) tümörün marjları gelen t. İğne elektrotlar durumunda bakım bütün iğneler elektrik alanının uygun bir dağılım elde etmek için doku eklenir dikkat edilmelidir. bir jel uygulanması gerekli değildir. Aksi takdirde, işlem plaka elektrot durumunda olduğu gibi aynıdır. elektrik darbeleri uygulama alanında deri depilate Sisplatin veya bleomisin yönetin. sitostatik uygulandığında ise intravenöz 8 dakika ve elektrik bakliyat teslimi için zaman aralığı için bekleyin 20 dk. Sitostatik intratümöral olarak uygulanır derhal elektrik palslarının tatbiki ile başlar (enjeksiyondan sonra 1 dakika içinde). elektrik darbeleri uygulanmasından önce tüy dökücü krem ​​uygulanmış deri üzerine bir su bazlı jel uygulanır. plaka elektrotlar bu darbe parametreleri kullanın: elektrot darbe süresi 100 mikro-sn, genlik mesafe oranı 1.300 V /sm, frekans 1 Hz ya da 5 kHz. iki dikey yönde, 1 saniye arayla dört darbelerinin iki trenlerde 8 kutuplu elektrik darbeleri her çalışması verin. mesafe oranı ne 1,000 V / cm, frekans 1 veya 5 kHz elektrot nabız 100 mikro-sn süresi, genliği: satır ile iğne elektrotlar için nabız parametrelerini kullanın. tek kutuplu elektrik darbeleri her çalışma sekiz bakliyat oluşur. İğne elektrotlar için, bir altıgen yapılandırma ve kullanım nabız parametreleri düzenlemek: 100 mikro-sn darbe süresi; 5 kHz frekans ve darbe sayısı olan iğneler sayısına bağlıdır, altıgen elektrot 730 V sabit voltaj (1,040 V / cm elektrotlar arasındaki mesafe 7 mm ise) sahiptir. 7 iğne halinde 24 darbe uygulandığı kirlenmiş malzemenin atılması. yakma işlemi için tasarlanmış bir kapta tüm kontamine olmuş aletlerle (şırıngalar, iğneler, şişeler, gazlı bez, eldiven) atınız. <p class="jove_title"> 5. Takip et NOT: Her ziyarette, tümör nodülleri bir Vernier kumpas ve fotoğraflandı ile ölçülür. Bu ziyaretler de mümkündür lokal ve sistemik yan etkileri değerlendirmek amacıyla hizmet vermektedir. Tedaviye yanıt "solid tümörlerde Tepki değerlendirme kriterleri" tam bir yanıt olarak (RECIST) 19 (CR) kriterlerine göre 4 hafta sonra atılırsa – en azından% 30 – nodül, kısmi yanıt (PR) ortadan kaybolması referans küçük olarak alarak, hedef lezyonların çapları toplamı en az% 20'lik bir artış – bir referans olarak bazal toplamı çapları, ilerleyici hastalığı (PD) alarak, hedef lezyonun çaplarının toplamı azalma toplam çalışılan, stabil hastalık (SD) – ne PR hak kazanmak için yeterli bir küçülme, ne de bir referans küçük toplam çapları olarak alınan PD hak kazanmak için yeterli bir artış. Tüm yanıt tanımları için minimum 4 haftalık süresi qu için gereklidirkarşılık her tür alifying. Gözlem süresi, ilk tedavinin tarih ve hastanın son muayene tarihi arasındaki zaman aralığı olarak hesaplanır. Her takip muayenesinde 20 – Olası yan etkiler Veteriner Kooperatif Onkoloji Grubu toksisite ölçeğinde (CTCAE VCOG) göre belirlenir. tedavi sonrası bir randevuyu 1 hafta programlayın. 2 hafta tedaviden sonra randevu. 4 hafta tedavi sonrasında randevu. 4 hafta sonra ayda bir kez randevu.

Representative Results

olgu köpeğin göz kapağı üzerinde bulunan bir mast hücresi tümörü sunar. Hasta tümör içine enjekte sisplatin ve plaka elektrotları kullanarak 8 elektrik palslarının tatbiki ile muamele edilmiştir. tümör büyüklüğü 5 mm idi. Tümörün konumu, genel anestezi hassas alan için kullanılmıştır. Sisplatin, tümör, 0.5 ml (0.5 mg) büyüklüğüne göre intratümöral enjekte edildi. Bir dakika enjeksiyonundan sonra elektrik darbeleri 8 mm levha elektrot kullanarak uygulanmıştır. elektrik darbeleri yönetilen tek uygulandı. yeterli bilinci yerine gelene kadar tedaviden sonra hasta denetlendi. Hasta iki saat sonra serbest bırakıldı. Bir hafta sonra hasta normal bir check-up için geldi. Tümör ülserli ve tümör çevresi biraz şişmişti. Tümör Vernier kumpas ve fotoğraflandı ölçüldü. Bir ay sonra, kaplama işlnemsit tümörün başka kanıt tespit edildi. yara kapatıldı ve alopesi ile sikatris tedavi yerinde görüldü. Köpek ağrı herhangi bir belirti yoktu tedavi sonrasında, göz kapağı fonksiyonu tüm iyileşme döneminde korunmuş ve tedavi sonrası kozmetik etkileri mükemmel. Şekil 1. Elektrokemoterapi tedavisi. Muamele (A) önce, köpek gösteren Şekil, bir hafta (B), bir ay (C) ve tedaviden üç ay (D) eklenmiştir. Alt göz kapağında (A) Mast hücresi tümörü. tedaviye başlamadan önce 5 mm tümör boyutu ile 2.5 yaşındaki Alman boksör köpek. (B) tedavisinden sonra tümör ulcerate başladı ve Electroporated alanı çevreleyen doku hafifçe şişti. iki bizEKS tedavisi sonrası kabuk tümör bölgesinde oluşturulmuş ve (gösterilmemiş olan) düştü. (C) tümör bulgusu not edildi ve alopesi ile sikatris tümör yerinde görüldü Elektrokemoterapi bir ay sonra. (D) Elektrokemoterapi toplam re-epitelizasyonu üç ay sonra tümör yerinde meydana geldi. Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız. Çalışma yöntemi (OM) Sayısı, hacmi ve tümör nodüllerinin Yer bir B 1-3 nodül <cilt ve ağız tümörleri cm³ 1 √> 3 nodüller, herhangi bir hacim cilt ve ağız tümörleri baş √ </td> herhangi bir sayı, deri ve ağız tümörleri başın herhangi bir hacim √ Çalışma yöntemi Tablo 1. Seçim tümör nodülü ve büyüklüğü sayısına bağlıdır Derin sedasyon = OM A.; Genel anestezi = OM B. tümör kemoterapötik ilaç / boy Tümör içine uygulama İntravenöz uygulamaya Sisplatin doz (1 mg / ml) <1 cm3 1 ml (1 mg) > 1 cm3 0.5-1 mi (0.5-1 mg) / tümör cm3 Bleomisin dozu (3.000 IU / ml) <1 cm 3 0.5 mi (1.500 iu) tumo bölgesinin > 1 cm 3 0,5-1 mi (1,500-3,000 IU) / tümör cm3 300 lU / kg Tablo 2. köpeklerde uygulama yoluna ve tümör boyutu uygun sitostatiklerin uygun enjeksiyon hacmi. tümör kemoterapötik ilaç / boy Tümör içine uygulama İntravenöz uygulamaya Bleomisin dozu (3.000 IU / ml) <1 cm 3 0.5 mi (1.500 iu) tümör > 1 cm 3 0,5-1 mi (1.500 – 3.000 IU) tümör / cm3 300 lU / kg <p clfo eşek = "jove_content": keep-together.within-page = "1"> Tablo 3. kedilerde tümör büyüklüğüne göre Sitostatiklerin uygun enjeksiyon hacmi.

Discussion

Elektrokemoterapi köpeklerde ve kedilerde başka primer tümör veya metastaz karşı oldukça etkili olduğu kanıtlanmıştır. Elektrokemoterapi tek veya birden fazla, kutanöz veya deri altı tümör modüllerinin ya da cerrahi bir adjuvan tedavi olarak küratif kullanılabilir. mast hücreli tümörler de dahil olmak üzere köpeklerde çeşitli tümörler, tercih edilen standart tedavi tümörün cerrahi çıkarılmasıdır. Köpeklerde mast hücre tümörleri tedavi etmek ECT'ye verilen standart bir tedavi olarak cerrahi karşılaştıran bir çalışma, cerrahi tam yanıt,% 50, ECT cerrahi eşdeğer tedavi 11 gösteren sonuçlanırken ECT ile tedavi komple tepkiler% 70 ile sonuçlandığını göstermiştir.

EKT telaffuz antitümör etkinliği için iki koşulun protokolü içinde kritik adımlar olan, yerine getirilmesi gerekir. Birincisi sitostatik uygulanmasıdır. Hedef dokularda ilacın varlığı, ECT etkinliğini belirlerİlaç onları öldürmek için hücre içinde bulunması gerekir olarak. intratümöral ilacı enjekte zaman iyi doku tutma işareti doku beyazlatma olduğunu. Ayrıca, uygulamadan sonra çözümün bazı kaçak tümör iğne ile ya da daha fazla EKT seansları sırasında dokular nekrotizan üretilen deliklerden meydana gelebilir. Bu durumda, 1 mg / cm3 (sisplatin) ya da 3000 UI / cm 3 ulaşan (bleomisin) konsantrasyonları sonra bu durumlarda tamamen teorik olabilir, bununla birlikte, hedef, hedef dokularda mümkün olduğu kadar çözelti korumak için çalışmaktır. Buna ek olarak, elektrik darbeleri çözeltisi tutma katkıda bulunan bir vazokonstriktör etki elde etmek amacıyla, mümkün olduğunca hızlı bir şekilde uygulanmalıdır.

tatbikat iki farklı yolları ECT ile kullanılabilir: tümör ve damar içine. Intravenöz bleomisin ile intratümöral sisplatin veya bleomisin veya EKT antitümör etkinliği ele oysa 21 karşılaştırılabilirSisplatin intravenöz uygulama ile ctrochemotherapy 22 nedenle sisplatin, sadece tümör yönetiminde kullanılan daha az etkilidir. Sisplatin ilacın diğer bir önemli özelliği, sisplatin kediler 23 son derece zehirli olduğu gösterilmiştir gibi kedilerde kullanımı kontrendikedir olmasıdır. Hasta, bir veya bir kaç nodüller varsa, o zaman, bir tümör yol önerilmektedir. nodüllerin sayısı ~ 5 nodüller aşarsa, o zaman bir damar içi yol önerilmektedir. bleomisin, yüksek olması nedeniyle hidrofilik doğasına, yapar iken sisplatin tümör içi enjeksiyon, daha elektrik darbeleri uygulanmaksızın bir anti-tümör etkinliği vardır. Bu nedenle, sisplatin intratümöral uygulama köpeklerde mümkün olup olmadığını seçilecek ilk ilaçtır. Bunun nedeni EKT etkili antitümör eylem için yerine getirilmesi gereken ikinci durumun önemli olduğunu ve bu yeterince yüksek bir elektrik alanı ile tüm tümör kapsama. hücre artışı elde etmek içinmembran permeabilization, doku içinde indüklenen elektrik alan belli bir eşiği aşması gerekir. dokuda elektrik alanı dağılımı nedenle kullanılan elektrot ne tür önemlidir, elektrotlar bağlıdır. Plaka veya paralel dizi elektrotlar güvenle küçük yüzeysel tümörlerin 24 için kullanılabilir. tümörler daha kalın ve daha büyük ise, altıgen elektrotlar daha uygundur. Önemli bir gerçektir elektrik darbeleri uygulama tüm tümör alan güvenlik marjları da dahil olmak üzere, örtülü, böylece tekrar edilebilir olmasıdır. elektrik bakliyat vasküler kilit neden olduğundan, bunların uygulama merkezine doğru, tümörün kenarından başlamalıdır.

Şu anda, tekniğin sınırlama derin tümörlerin tedavisini engelleyen elektrotlar mevcudiyetidir. Ancak, elektrotların yapılandırması hızla gelişiyor ve şimdi elektrotların farklı setleri f kullanılan teknolojik bir özelliktirveya belirli yönetimler uzun iğne karaciğer 25 kolorektal tümörlerin metastaz için tek elektrotlar, kemik metastazları 7, beyin tümörleri 8 için yumuşak doku sarkomu 26, kolorektal için Endoluminal elektrotlar, mide ve özofagus tümörleri 27 ve genişletilebilir 'şemsiye' tipi elektrotlar .

EKT bir kerelik tedavi sadece etkili olabilir, ancak başarısızlık veya kısmi tümör yanıtının durumunda geliştirilmiş etkinliği ile birkaç kez tekrar edilebilir. ECT lokal ablasyon tedavi yöntemidir. Yerel etkinliği lokal tümör kontrolü% 80'e varan ancak tedavinin başka sınırlama ise uzak metastaz 7, bir fark etkisi yoktur. Bu nedenle, sistemik tepki elde etmek için, ECT diğer tedaviler ile kombine edilebilir. Son zamanlarda, biz immünomodülatör Molec başka biyomedikal elektroporasyon uygulaması, yani gen electrotransfer ile EKT birleştirerek önerdiule interlökin-12 (IL-12), kendi anti-tümör aktivitesi için bilinmektedir. ECT ve IL-12 gen elektrotransfer kombinasyonu daha önce, aynı zamanda uzak metastazların tekrar oluşumunu önlemiştir yüksek tam cevap hızı 28 ile bir yan etkileri ve iyi bir lokal tümör ile güvenli kombine tedavi olarak gösterilmiştir.

Sonuç olarak, Elektrokemoterapi avantajları sadeliği, tedavi seansları, düşük sitostatik dozlarda ve önemsiz yan etkileri kısa süreli vardır. Buna ek olarak, ayaktan yapılır, bu nedenle, hastalar hastanede kalmak zorunda değilsiniz.

Günümüzde piyasada elektrik darbeleri farklı jeneratörler durumu güvenilirliği kaybı ile jeneratör ve fiyat düşürme ve böylelikle Elektrokemoterapi daha uygun hale getirmek için, aynı zamanda gelen artmaktadır. Bunlar veterinerlik tıbbında bu tedavinin daha geniş kullanımına yol açacaktır.

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

The authors acknowledge the financial support received from the state budget by the Slovenian Research Agency (program no. P3-0003, project no. J3-6796). The research was conducted in the scope of the EBAM European Associated Laboratory (LEA). This manuscript is the result of the networking efforts of the COST Action TD1104. We wish to thank Alenka Seliskar, Mojca Juvan (Veterinary Faculty, Clinic for Surgery and Small Animals) and Jakob Konda (Institute of Oncology, Ljubljana, Ljubljana, Slovenia) for all of their valuable help.

Materials

Cisplatin Kobi Fresenius Kobi Oncology, Hampshire, Great Britain citostatic drug
Bleomycin PCH Pharmachemie B.V., Haarlem, Dutch citostatic drug
AquaUltra Basic Ultragel, Budapest, Hungary water based gel 
Electropulsator ELECTROvetS13  Leroy Betatech, Toulouse, France square-wave pulse generator
DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Mir, L. M., Orlowski, S., Belehradek, J., Paoletti, C. Electrochemotherapy potentiation of antitumour effect of bleomycin by local electric pulses. Eur J Cancer. 27 (1), 68-72 (1991).
  2. Sersa, G., Cemazar, M., Miklavcic, D. Antitumor effectiveness of electrochemotherapy with cis-diamminedichloroplatinum(II) in mice. Cancer Res. 55 (15), 3450-3455 (1995).
  3. Sersa, G., et al. Electrochemotherapy in treatment of tumours. Eur J Surg Oncol. 34 (2), 232-240 (2008).
  4. Sersa, G., Cemazar, M., Miklavcic, D., Chaplin, D. J. Tumor blood flow modifying effect of electrochemotherapy with bleomycin. Anticancer Res. 19 (5B), 4017-4022 (1999).
  5. Markelc, B., Sersa, G., Cemazar, M. Differential mechanisms associated with vascular disrupting action of electrochemotherapy: intravital microscopy on the level of single normal and tumor blood vessels. PLoS One. 8 (3), e59557 (2013).
  6. Bellard, E., et al. Intravital microscopy at the single vessel level brings new insights of vascular modification mechanisms induced by electropermeabilization. J Control Release. 163 (3), 396-403 (2012).
  7. Sersa, G., et al. Electrochemotherapy of tumors as in situ vaccination boosted by immunogene electrotransfer. Cancer Immunol Immunother. 64 (10), 1315-1327 (2015).
  8. Linnert, M., Iversen, H. K., Gehl, J., et al. Multiple brain metastases – current management and perspectives for treatment with electrochemotherapy. Radio Oncol. 46 (4), 271-278 (2012).
  9. Bianchi, G., Campanacci, L., Donati, D. Electrochemotherapy in bone metastases: results of a phase II study. , 46-47 (2013).
  10. Edhemovic, I., et al. Intraoperative electrochemotherapy of colorectal liver metastases. J Surg Oncol. 110 (3), 320-327 (2014).
  11. Kodre, V., et al. Electrochemotherapy compared to surgery for treatment of canine mast cell tumours. In Vivo. 23 (1), 55-62 (2009).
  12. Spugnini, E. P., et al. Electrochemotherapy for the treatment of recurring aponeurotic fibromatosis in a dog. Can Vet J. 54 (6), 606-609 (2013).
  13. Tozon, N., Pavlin, D., Sersa, G., Dolinsek, T., Cemazar, M. Electrochemotherapy with intravenous bleomycin injection: an observational study in superficial squamous cell carcinoma in cats. J Feline Med Surg. 16 (4), 291-299 (2014).
  14. Tamzali, Y., et al. Successful treatment of equine sarcoids with cisplatin electrochemotherapy: a retrospective study of 48 cases. Equine Vet J. 44 (2), 214-220 (2012).
  15. Mali, B., et al. Tumor size and effectiveness of electrochemotherapy. Radiol Oncol. 47 (1), 32-41 (2013).
  16. Blackwood, L., et al. European consensus document on mast cell tumors in dogs and cats. Vet Comp Oncol. 10 (3), e1-e29 (2012).
  17. Ivorra, A., Al-Sakere, B., Rubinsky, B., Mir, L. M. Use of conductive gels for electric field homogenization increases the antitumor efficacy of electroporation therapies. Phys Med Biol. 53 (22), 6605-6618 (2008).
  18. Suzuki, D. O. H., Marques, C. M. G., Rangel, M. M. M. Conductive Gel Increases the Small Tumor Treatment With Electrochemotherapy Using Needle Electrodes. Artif Organs. , (2016).
  19. Eisenhauer, E. A., et al. New response evaluation criteria in solid tumours: revised RECIST guideline (version 1.1). Eur J Cancer. 45 (2), 228-247 (2009).
  20. Veterinary Co-operative Oncology Group (VCOG). Veterinary Co-operative Oncology Group – Common Terminology Criteria for Adverse Events (VCOG-CTCAE) following chemotherapy or biological antineoplastic therapy in dogs and cats v1.0. Veterinary and Comparative Oncology. 2 (4), 195-213 (2004).
  21. Cemazar, M., et al. Electrochemotherapy in veterinary oncology. J Vet Intern Med. 22 (4), 826-831 (2008).
  22. Sersa, G. Electrochemotherapy: animal model work review. Methods Mol Med. 37, 119-136 (2000).
  23. Knapp, D. W., Richardson, R. C., DeNicola, D. B., Long, G. G., Blevins, W. E. Cisplatin toxicity in cats. J Vet Intern Med. 1 (1), 29-35 (1987).
  24. Cemazar, M., Golzio, M., Sersa, G., Rols, M. P., Teissie, J. Electrically-assisted nucleic acid delivery to tissues in vivo: where do we stand?. Curr Pharm Des. 12 (29), 3817-3825 (2006).
  25. Edhemovic, I., et al. Electrochemotherapy: a new technological approach in the treatment of metastases in the liver. Technol Cancer Res Treat. 10 (5), 475-485 (2011).
  26. Campana, L. G., et al. Electrochemotherapy treatment of locally advanced and metastatic soft tissue sarcomas: results of a non-comparative phase II study. World J Surg. 38 (4), 813-822 (2014).
  27. Soden, D. M., et al. Successful application of targeted electrochemotherapy using novel flexible electrodes and low dose bleomycin to solid tumours. Cancer Lett. 232 (2), 300-310 (2006).
  28. Cemazar, M., Avgustin Ambrozic, J., Pavlin, D., Sersa, G., Poli, A., Krhac Levacic, A., Tesic, N., Lampreht Tratar, U., Rak, M., Tozon, N. Efficacy and safety of electrochemotherapy combined with peritumoral IL-12 gene electrotransfer of canine mast cell tumours. Vet Comp Oncol. , (2016).

Tags

ElectrochemotherapyTumor TreatmentDogsCatsCytostatic DrugsElectroporationBleomycinCisplatinIntratumoral InjectionIntravenous InjectionElectric PulsesPlate ElectrodesNeedle ElectrodesVasoconstrictionDrug Retention

Play Video
PDF
DOI
DOWNLOAD MATERIALS LIST
Cite This Article
Tozon, N., Lampreht Tratar, U., Znidar, K., Sersa, G., Teissie, J., Cemazar, M. Operating Procedures of the Electrochemotherapy for Treatment of Tumor in Dogs and Cats. J. Vis. Exp. (116), e54760, doi:10.3791/54760 (2016).
Download Citation
Reprints and Permissions

View Video

✖

To prove you're not a robot, please enter the text in the image below

CAPTCHA Image
Play CAPTCHA Audio
Refresh Image