Almohadillas de grasa mammary descelularizantes: Derivando hidrogeles matrix extracelulares de almohadillas de grasa mammary
Published: April 30, 2023
Abstract
Fuente: Alves et. al., Estudio de efectos normales de radiación tisular utilizando hidrogeles de matriz extracelular. J. Vis. Exp. (2019).
Este video describe una técnica de derivar hidrogeles de matriz extracelular mediante la descelularización de almohadillas de grasa mamaria murina después de la irradiación ex vivo para estudios in vitro. Este hidrogel ayuda a imitar el ambiente in vivo del tejido mamario después del tratamiento con radiación para estudiar el comportamiento de las células tumorales.
Protocol
1. Descelularización NOTA: Este procedimiento fue adaptado a partir de métodos publicados previamente centrados en la descelularización adiposa, que incluía el detergente iónico desoxicolato de sodio en lugar de sulfato de dodecilo sódico para eliminar el ADN de manera eficiente. El día 1,retire las almohadillas de grasa mammary congeladas o los MFP de -80 °C y descongele a temperatura ambiente. Una vez descongelado, seque b…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Materials
| 10% Neutral Buffered Formalin, Cube with Spigot | VWR | 16004-128 | |
| 2-methylbutane | Alfa Aesar | 19387 | |
| Bovine Serum Albumin | Sigma-Aldrich | A1933-25G | |
| Dulbecco's phosphate-buffered saline | Gibco | 14040133 | |
| Fisher Healthcare Tissue-Plus O.C.T. Compound | Fisher Scientific | 23-730-571 | cryostat embedding medium |
| Kimtech Science Kimwipes | Kimberly Clark | delicate task wipes | |
| n-Propanol (Peroxide-Free/ Sequencing), Fisher BioReagents | Fisher Scientific | BP1130-500 | |
| PBS (10X), pH 7.4 | Quality Biological, Inc. | 119-069-151 | Phosphate-buffered saline |
| Penicillin-Streptomycin | Gibco | 15140-122 | |
| Peracetic acid | Sigma-Aldrich | 77240-100ML | |
| Triton x-100 | Sigma-Aldrich | X100-100ML | t-Octylphenoxypolyethoxyethanol |
| Trypsin-EDTA (0.25%), phenol red | Gibco | 25200-056 | |
| Richard-Allan Scientific Signature Series Hematoxylin 7211 | Richard-Allan Scientific | 7211 | |
| Whatman qualitative filter paper, Grade 4 | Whatman | 1004-110 | grade 4 qualitative filter paper |
| Xylenes (Certified ACS), Fisher Chemical | Fisher Scientific | X5-5 |
Cite This Article
Decellularizing Mammary Fat Pads: Deriving Extracellular Matrix Hydrogels from Mammary Fat Pads. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20229, doi: (2023).