Decellularizing רפידות שומן Mammary: נגזרת הידרוג'ל מטריקס חוץ תאיים מרפידות שומן ממרי
Published: April 30, 2023
Abstract
מקור: Alves et. al., לימוד השפעות קרינת רקמות נורמלית באמצעות מטריקס הידרוג’לים חוץ-תאיים.
וידאו זה מתאר טכניקה של נגזרת הידרוג’ל מטריצה חוץ-תאית על ידי decellularizing רפידות שומן mammary מורין בעקבות הקרנת ex vivo למחקרים במבחנה. הידרוג’ל זה מסייע לחקות את סביבת רקמת השד in vivo לאחר הקרינה כדי ללמוד התנהגות תאים סרטניים.
Protocol
1. דקלולריזציה שים לב: הליך זה הותאם משיטות שפורסמו בעבר התמקדו decellularization שומן, שכלל את חומר ניקוי יוני נתרן deoxycholate ולא נתרן דודקיל סולפט כדי להסיר DNA ביעילות. ביום הראשון, להסיר רפידות שומן Mammary קפוא או MFPs מ -80 מעלות צלזיוס ולהפשיר בטמפרטורת החדר.</li…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Materials
| 10% Neutral Buffered Formalin, Cube with Spigot | VWR | 16004-128 | |
| 2-methylbutane | Alfa Aesar | 19387 | |
| Bovine Serum Albumin | Sigma-Aldrich | A1933-25G | |
| Dulbecco's phosphate-buffered saline | Gibco | 14040133 | |
| Fisher Healthcare Tissue-Plus O.C.T. Compound | Fisher Scientific | 23-730-571 | cryostat embedding medium |
| Kimtech Science Kimwipes | Kimberly Clark | delicate task wipes | |
| n-Propanol (Peroxide-Free/ Sequencing), Fisher BioReagents | Fisher Scientific | BP1130-500 | |
| PBS (10X), pH 7.4 | Quality Biological, Inc. | 119-069-151 | Phosphate-buffered saline |
| Penicillin-Streptomycin | Gibco | 15140-122 | |
| Peracetic acid | Sigma-Aldrich | 77240-100ML | |
| Triton x-100 | Sigma-Aldrich | X100-100ML | t-Octylphenoxypolyethoxyethanol |
| Trypsin-EDTA (0.25%), phenol red | Gibco | 25200-056 | |
| Richard-Allan Scientific Signature Series Hematoxylin 7211 | Richard-Allan Scientific | 7211 | |
| Whatman qualitative filter paper, Grade 4 | Whatman | 1004-110 | grade 4 qualitative filter paper |
| Xylenes (Certified ACS), Fisher Chemical | Fisher Scientific | X5-5 |
Cite This Article
Decellularizing Mammary Fat Pads: Deriving Extracellular Matrix Hydrogels from Mammary Fat Pads. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20229, doi: (2023).