סרטון זה מתאר את הניתוק הלא אנזימטי של רקמה אנושית טרייה כדי להשיג תאים בני קיימא. הטכניקה משמשת לניתוח איכותי כמותי של תאים חיוביים CD45 (לימפוציטים / לויקוציטים) הנמצאים ברקמות אנושיות נורמליות וממאירות שונות.
Protocol
1. הכנת הרקמה הומוגנטית ניתוח רקמות מנוכות (רקמות ממאירות ונורמליות שהושלכו מחדר הניתוח) נמצאות במעבדה הפתולוגית על ידי כוח אדם מיומן לאיסוף מיידי. גידול, NANT (נלקח את המרחק הרחוק ביותר מן הגידול ככל האפשר) שברי רקמות נורמלי מעובדים באופן שגרתי בתוך 1 – 3 שעות של כריתה כירורגית במעבדה BSL2 ?…
Representative Results
איור 1: תרשים זרימת פרוטוקול. ההליך שלנו לעיבוד רקמות אנושיות טריות וכמה גישות אנליטיות שניתן להשתמש בהן לאחר מכן כדי להעריך לימפוציטים החודרים לרקמות אנושיות מוצגים. …
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Materials
GentleMacs Dissociator
Miltenyi Biotec
130-093-235
BD Medimachine is somewhat equivalent
Centrifuge 5810 R
Eppendorf
or other standard table top centrifuge
Centrifuge 5417 R
Eppendorf
or other standard microcentrifuge
Esco Class II A2 Biosafety Cabinet
ESCO global
or other standard BSL2 hood
Inverted Microscope
Nikon eclipse TS100
or other microscope compatible for a hemacytometer