島のアッセイ: ショウジョウバエ ・ロコ運動行動を評価するハイスループット法
Published: April 30, 2023
Abstract
出典: アイドホフ, I., 他.ショウジョウバエ島アッセイにおけるロコモ運動行動のハイスループット分析.J. ヴィス・エクス(2017).
このビデオでは、 ショウジョウバエ の移動を研究するために使用される行動方法である島のアッセイについて説明します。サンプルプロトコルは半自動画像分析と互換性があるアッセイのためのセットアップを特色にする。
Protocol
このプロトコルは、ヨウジョウバエ島アッセイ、J.Vis.Exp.(2017)におけるロコモド挙動のハイスループット分析からの抜粋です。 1. 島のアッセイボックスの建設 ポリメチルメタクリレート(PMMA)などの堅牢な材料で作られたトレイを準備し、水の層(すなわち 、お風呂)を含めます。材料が白でないことを確認します。注:</…
Representative Results
図1:島のアッセイの要件、実験手順、および分析を概説するフローチャート。(A)島のアッセイ機器。(B) 島のアッセイの実験(C)島のアッセイ。(D) ショウジョウバエ島アッセイマクロを用いた島のアッセイデータの処理「ショウジョウバエ島アッセイ」マ?…
Materials
| 25 x 95 mm Drosophila vials | Flystuff | 32-116SB | – |
| Logitech C525 HD Webcam | Logitech | – | Any webcam with USB connection is suitable. |
| Stand to hold webcam | – | – | – |
| Lamp | – | – | 12 V LED lights are appropriate |
| Pounding pad | – | – | Any mouse pad works |
| Island Assay box | – | – | Dimensions 40x35x2.5 cm. Hole 20×30 cm. Transparent. |
| Island Assay bath | – | – | Dimensions 42x38x25 cm. Non white. |
| Island/platform | – | – | Dimensions 42x38x25 cm. Uniform white. |
| Soap | – | – | Standard dishwashing detergent is suitable. |
| Computer | – | – | Scripts run both on Windows and Mac |
| Image-recording software: HandiAvi® | AZcendant® | – | HandyAvi is only compatible with Windows and has been described throughout the manuscript. It can be downloaded from: http://www.azcendant.com/DownloadHandyAvi.html (version 5.0) |
| Image-recording software: WebcamCapture | – | – | Fiji/ImageJ plugin that can be used on Mac alternative to HandyAvi for image-recordings and can be downloaded from: https://imagej.nih.gov/ij/plugins/webcam-capture/ When using this method, the user has to use the same folder setup and image-recording settings indicated in this manuscript, with the exception that for each experimental replicate, the captured image stack should be exported as Stack.tiff to the corresponding experimental replicate folder. Upon running the "Drosophila Island Assay" macro on this data, no text should be present in the "First frame identifier" setting. |
Cite This Article
Island Assay: A High-Throughput Method to Evaluate Drosophila Locomotor Behavior. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20103, doi: (2023).