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Quantifizierung reaktiver Sauerstoffspezies mittels 2′,7′-Dichlorfluorescein-Diacetatsonde und Durchflusszytometrie in Müller-Gliazellen
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Quantification of Reactive Oxygen Species Using 2′,7′-Dichlorofluorescein Diacetate Probe and Flow-Cytometry in Müller Glial Cells
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Quantifizierung reaktiver Sauerstoffspezies mittels 2′,7′-Dichlorfluorescein-Diacetatsonde und Durchflusszytometrie in Müller-Gliazellen

Deutsch

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14:25 min

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May 13, 2022

DOI:

10.3791/63337-v

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10.3791/63337-v

•

14:25 min
May 13, 2022

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1Departamento de Bioquímica Clínica, Facultad de Ciencias Químicas,Universidad Nacional de Córdoba, 2Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología (CIBICI),Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas (CONICET), 3Instituto de Investigación Médica Mercedes y Martín Ferreyra (INIMEC),Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas (CONICET)

Summary

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Hier schlagen wir ein systematisiertes, zugängliches und reproduzierbares Protokoll vor, um zelluläre reaktive Sauerstoffspezies (ROS) unter Verwendung einer 2′,7′-Dichlorfluorescein-Diacetatsonde (DCFH-DA) in Müller-Gliazellen (MGCs) nachzuweisen. Diese Methode quantifiziert die gesamten zellulären ROS-Spiegel mit einem Durchflusszytometer. Dieses Protokoll ist sehr einfach zu bedienen, geeignet und reproduzierbar.

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Reactive Oxygen SpeciesROS2′7′-dichlorofluorescein DiacetateDCFDAFlow CytometryOxidative StressCell MembraneEsterasesDichlorofluoresceinAntioxidantROS InducerDMEMPBSCentrifugationFACS Buffer

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Vaglienti, M. V., Subirada, P. V., Barcelona, P. F., Bonacci, G., Sanchez, M. C. Quantification of Reactive Oxygen Species Using 2′,7′-Dichlorofluorescein Diacetate Probe and Flow-Cytometry in Müller Glial Cells. J. Vis. Exp. (183), e63337, doi:10.3791/63337 (2022).

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