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Producción de vectores de virus adenoasociados en pilas celulares para estudios preclínicos en modelos animales grandes
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Production of Adeno-Associated Virus Vectors in Cell Stacks for Preclinical Studies in Large Animal Models
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Producción de vectores de virus adenoasociados en pilas celulares para estudios preclínicos en modelos animales grandes

español

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07:21 min

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June 30, 2021

DOI:

10.3791/62727-v

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10.3791/62727-v

•

07:21 min
June 30, 2021

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1Department of Pathobiology,University of Guelph

Summary

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Aquí proporcionamos un procedimiento detallado para la producción a gran escala de vectores AAV de grado de investigación utilizando células HEK 293 adherentes cultivadas en pilas celulares y purificación por cromatografía de afinidad. Este protocolo produce consistentemente >1 x 1013 genomas vectoriales / ml, proporcionando cantidades vectoriales apropiadas para estudios con animales grandes.

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Adeno-associated VirusAAVViral Vector ProductionHEK293 CellsCell StacksPreclinical StudiesLarge Animal ModelsGene TherapyHeparan SulfateCell CulturePolyethyleneimineCentrifugationClarified SupernatantCell Pellets

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Rghei, A. D., Stevens, B. A. Y., Thomas, S. P., Yates, J. G. E., McLeod, B. M., Karimi, K., Susta, L., Bridle, B. W., Wootton, S. K. Production of Adeno-Associated Virus Vectors in Cell Stacks for Preclinical Studies in Large Animal Models. J. Vis. Exp. (172), e62727, doi:10.3791/62727 (2021).

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