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大型動物モデルにおける前臨床試験のための細胞スタックにおけるアデノ関連ウイルスベクターの生成
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Production of Adeno-Associated Virus Vectors in Cell Stacks for Preclinical Studies in Large Animal Models
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大型動物モデルにおける前臨床試験のための細胞スタックにおけるアデノ関連ウイルスベクターの生成

DOI:
10.3791/62727-v

•

07:21 min

•

June 30, 2021

•

, , , , , , , ,
1Department of Pathobiology,University of Guelph

Chapters

  • 00:04Introduction
  • 00:46Double Plasmid Transfection of HEK293 Cells in Cell Stacks
  • 02:30Harvesting Adeno-Associated Virus AAV and Chemical Lysis of The Transfected HEK293 Cells
  • 03:23AAV Vector Purification Using Heparin Affinity Chromatography
  • 05:45Results: Serum Human Monoclonal Antibody (hIgG) Expression in Animals Upon Administration of AAV6.2FF-hIgG
  • 06:41Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

ここでは、細胞スタックで増殖した付着HEK 293細胞とアフィニティークロマトグラフィー精製を用いた研究用AAVベクターの大規模生産に関する詳細な手順を提供する。このプロトコルは一貫して>1 x 1013 のベクターゲノム/mLを生成し、大規模な動物実験に適したベクター量を提供する。

Tags

Adeno-associated VirusAAVViral Vector ProductionHEK293 CellsCell StacksPreclinical StudiesLarge Animal ModelsGene TherapyHeparan SulfateCell CulturePolyethyleneimineCentrifugationClarified SupernatantCell Pellets

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