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Herstellung von Adeno-assoziierten Virusvektoren in Zellstapeln für präklinische Studien in Großtiermodellen
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Production of Adeno-Associated Virus Vectors in Cell Stacks for Preclinical Studies in Large Animal Models
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Herstellung von Adeno-assoziierten Virusvektoren in Zellstapeln für präklinische Studien in Großtiermodellen

DOI:
10.3791/62727-v

•

07:21 min

•

June 30, 2021

•

, , , , , , , ,
1Department of Pathobiology,University of Guelph

Chapters

  • 00:04Introduction
  • 00:46Double Plasmid Transfection of HEK293 Cells in Cell Stacks
  • 02:30Harvesting Adeno-Associated Virus AAV and Chemical Lysis of The Transfected HEK293 Cells
  • 03:23AAV Vector Purification Using Heparin Affinity Chromatography
  • 05:45Results: Serum Human Monoclonal Antibody (hIgG) Expression in Animals Upon Administration of AAV6.2FF-hIgG
  • 06:41Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

Hier bieten wir ein detailliertes Verfahren für die großtechnische Produktion von AAV-Vektoren in Forschungsqualität unter Verwendung von adhärenten HEK 293-Zellen, die in Zellstapeln gezüchtet wurden, und affinitätschromatographischer Aufreinigung. Dieses Protokoll liefert konsistent >1 x 1013 Vektorgenomen/ml und liefert Vektormengen, die für Großtierstudien geeignet sind.

Tags

Adeno-associated VirusAAVViral Vector ProductionHEK293 CellsCell StacksPreclinical StudiesLarge Animal ModelsGene TherapyHeparan SulfateCell CulturePolyethyleneimineCentrifugationClarified SupernatantCell Pellets

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