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Utilisation de Grafix pour la détection des interacteurs transitoires des sous-complexes de Spliceosomes de Saccharomyces cerevisiae
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Utilization of Grafix for the Detection of Transient Interactors of Saccharomyces cerevisiae Spliceosome Subcomplexes
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Utilisation de Grafix pour la détection des interacteurs transitoires des sous-complexes de Spliceosomes de Saccharomyces cerevisiae

français

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05:44 min

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November 09, 2020

DOI:

10.3791/61994-v

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10.3791/61994-v

•

05:44 min
November 09, 2020

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1Department of Biochemistry, Institute of Chemistry,University of Sao Paulo

Summary

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Ici, nous décrivons l’utilisation de Grafix (Gradient Fixation), une centrifugation de gradient de glycérol en présence d’un réticulateur, pour identifier les interactions entre les facteurs d’épissage qui se lient transitoirement au complexe d’épissage.

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GrafixTransient InteractorsSaccharomyces CerevisiaeSpliceosome SubcomplexesGradient Fixation MethodGlycerol Gradient CentrifugationCross-linkerFixation ReagentsYeast Total Extract PreparationTap TagGlycerol GradientGlutaraldehydeGradient Master Device

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Carvalho, F. A., Barros, M. R. A., Girotto, T. P. F., Perona, M. G., Oliveira, C. C. Utilization of Grafix for the Detection of Transient Interactors of Saccharomyces cerevisiae Spliceosome Subcomplexes. J. Vis. Exp. (165), e61994, doi:10.3791/61994 (2020).

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