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Hohe Empfindlichkeit Messung der Transkription Faktor-DNA verbindlichen Affinitäten durch wettbewerbsfähige Titration mit Fluoreszenz-Mikroskopie
JoVE Journal
Biochemistry
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JoVE Journal Biochemistry
High Sensitivity Measurement of Transcription Factor-DNA Binding Affinities by Competitive Titration Using Fluorescence Microscopy
DOI:

06:38 min

February 07, 2019

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Chapters

  • 00:04Title
  • 01:00Oligomer Annealing
  • 01:45Gel Preparation
  • 03:35Addition of the Competitor DNA Solution and Image Acquisition
  • 04:41Competitive Titration Assay and the Fitting Procedure
  • 05:17Results: Determining TF-DNA Binding Affinities Using Fluorescence Microscopy
  • 06:07Conclusion

Summary

Automatic Translation

Hier präsentieren wir eine neuartige Methode zur Bestimmung der verbindlichen Affinitäten im Gleichgewicht und in Lösung mit hoher Empfindlichkeit auf einer großen Skala. Dies verbessert die Quantitative Analyse der Transkription Faktor-DNA-Bindung. Die Methode basiert auf automatisierten Fluoreszenz Anisotropie Messungen in ein kontrolliertes Abgabesystem.

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