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Une approche du G-quadruplex ADN-affinité pour la purification de l'activité enzymatique G4 Resolvase1
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A G-quadruplex DNA-affinity Approach for Purification of Enzymatically Active G4 Resolvase1
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Une approche du G-quadruplex ADN-affinité pour la purification de l'activité enzymatique G4 Resolvase1

français

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11:25 min

•

March 18, 2017

DOI:

10.3791/55496-v

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10.3791/55496-v

•

11:25 min
March 18, 2017

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1Department of Cancer Biology,Wake Forest School of Medicine, 2YX Genomics, 3Department of Biology,Ball State University, 4Department of Hematology and Oncology,Roper St. Francis Hospital

Summary

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G4 Resolvase1 se lie à G-quadruplex (G4) structures avec le plus serré affinité rapportée pour une protéine G4 contraignante et représente la majorité de l'activité de déroulage G4-ADN dans les cellules HeLa. Nous décrivons un nouveau protocole qui tire parti de l'affinité et de l'activité ATP-dépendante dévidage de G4-Resolvase1 pour purifier spécifiquement G4R1 recombinante catalytiquement active.

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G-quadruplex DNAG4 Resolvase1Enzymatic PurificationATP-dependent PurificationRecombinant ProteinBacterial ExpressionCatalytically Active EnzymeLysozymeProtease InhibitorSonicationCentrifugationStreptavidin Paramagnetic Beads

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Routh, E. D., Creacy, S. D., Beerbower, P. E., Akman, S. A., Vaughn, J. P., Smaldino, P. J. A G-quadruplex DNA-affinity Approach for Purification of Enzymatically Active G4 Resolvase1. J. Vis. Exp. (121), e55496, doi:10.3791/55496 (2017).

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