CRISPR / CAS系统内切酶的底物生成

DOI:

10.3791/4277-v

•

11:53 min

•

September 08, 2012

•

Judith Zoephel, Srivatsa Dwarakanath, Hagen Richter, André Plagens, Lennart Randau

¹Prokaryotic Small RNA Biology,Max-Planck-Institute for Terrestrial Microbiology

Chapters

00:05Title
01:37CRISPR/Cas System Overview
02:29Generation of Long Pre-crRNA Substrates via PCR
04:14Generation of Intermediate Pre-cdRNA Substrates via Annealing of DNA Oligonucleotides
06:10Generation of Short Cas RNA Substrates via Custom RNA Oligonucleotide Synthesis
06:41In vitro T7 RNA Polymerase Transcription
08:04Cas6 Endonuclease Assay
09:08Results: Representative Cas6 Endonuclease Assay
11:10Conclusion

Summary

Automatic Translation

CRISPR / CAS系统介导的适应性免疫中的细菌和古细菌。提出了许多CA蛋白作为核糖核酸内切酶作用于不同长度的crRNA前体。在这里，我们说明了三种不同的方法，CAS核酸内切酶活性的生化分析以产生前crRNA的底物。

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