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Eine Spin-Tip-Anreicherungsstrategie zur simultanen Analyse von N-Glykopeptiden und Phosphopeptiden aus menschlichem Bauchspeicheldrüsengewebe
JoVE Journal
Biyokimya
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JoVE Journal Biyokimya
A Spin-Tip Enrichment Strategy for Simultaneous Analysis of N-Glycopeptides and Phosphopeptides from Human Pancreatic Tissues

Eine Spin-Tip-Anreicherungsstrategie zur simultanen Analyse von N-Glykopeptiden und Phosphopeptiden aus menschlichem Bauchspeicheldrüsengewebe

DOI:

09:16 min

May 04, 2022

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Bölümler

  • 00:05Introduction
  • 01:12Tissue Cryo-Pulverization, Lysis, Protein Extraction
  • 03:35Protein Digestion and Desalting
  • 05:36Dual-Functional Ti(IV) Simultaneous Enrichment
  • 07:19Results: Dual-Functional Ti(IV)-IMAC Enrichment and Mass Spectrometry Analysis of Protein N-Glycosylation and Phosphorylation in Pancreatic Tissues
  • 08:37Conclusion

Özet

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Posttranslationale Modifikationen (PTMs) verändern Proteinstrukturen und -funktionen. Methoden zur gleichzeitigen Anreicherung mehrerer PTM-Typen können die Abdeckung in Analysen maximieren. Wir präsentieren ein Protokoll mit dual-funktioneller Ti(IV)-immobilisierter Metallaffinitätschromatographie, gefolgt von Massenspektrometrie zur gleichzeitigen Anreicherung und Analyse der Protein-N-Glykosylierung und Phosphorylierung in Pankreasgeweben.

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