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Immunopeptidomique : isolement de peptides associés à la souris et au CMH humain de classe I et II pour l’analyse par spectrométrie de masse
JoVE Journal
Biyokimya
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JoVE Journal Biyokimya
Immunopeptidomics: Isolation of Mouse and Human MHC Class I- and II-Associated Peptides for Mass Spectrometry Analysis

Immunopeptidomique : isolement de peptides associés à la souris et au CMH humain de classe I et II pour l’analyse par spectrométrie de masse

DOI:

09:32 min

October 15, 2021

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Bölümler

  • 00:04Introduction
  • 00:41Coupling Antibodies to Sepharose CNBr-Activated Beads
  • 02:57Cell Lysis and Immunocapture with Antibody Coupled-Beads
  • 04:06Elution of MHC Peptides
  • 07:11Results: Analysis of the MHC-Binding Affinity
  • 08:56Conclusion

Özet

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Nous présentons ici un protocole pour la purification des complexes peptidiques de classe I et de classe II du CMH à partir de lignées cellulaires de souris et d’humains fournissant des données immunopeptidomiques de haute qualité. Le protocole se concentre sur la préparation d’échantillons à l’aide d’anticorps disponibles dans le commerce.

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