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Caractérisation des jonctions neuromusculaires chez la souris par microscopie confocale et super-résolution combinée
JoVE Journal
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JoVE Journal Nörobilim
Characterization of Neuromuscular Junctions in Mice by Combined Confocal and Super-Resolution Microscopy
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Caractérisation des jonctions neuromusculaires chez la souris par microscopie confocale et super-résolution combinée

DOI:
10.3791/63032-v

•

11:03 min

•

December 08, 2021

•

, , , , ,
1Genethon, 91000, Evry, France, 2Université Paris-Saclay, Univ Evry, Inserm, Genethon, Integrare research unit UMR_S951, 91000, Evry, France, 3Ecole Pratique des Hautes Etudes, PSL Research University, 75014, Paris, France

Bölümler

  • 00:04Introduction
  • 01:17Dissection of Muscles and Immunostaining
  • 03:21Image Acquisition
  • 03:58Image Analysis to Calculate Postsynaptic NMJ Endplate Volume, MIP Area, and Relative Tortuosity
  • 05:05Image Analysis to Quantify Presynaptic Neurofilament Accumulation and Synaptic Vesicle Glycoprotein 2 Staining
  • 06:04Calculating the Distance Between Acetylcholine Receptor (AChR) Stripes and Their Width
  • 08:22Results: Multi Parameter Postsynaptic NMJ Characterization, STED Imaging, and Morphometric Analysis of Presynaptic Axon Terminal Distribution
  • 10:09Conclusion

Özet

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Ce protocole décrit une méthode d’analyse morphométrique des jonctions neuromusculaires par microscopie confocale et STED combinée qui est utilisée pour quantifier les changements pathologiques dans les modèles murins de SMA et de CMS liés à ColQ.

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Neuromuscular JunctionsConfocal MicroscopySuper-resolution MicroscopySTEDMuscle TeasingImmunostainingPresynaptic Axon TerminalsActive ZonesQuantitative Analysis3D StructureAnimal ModelsImage AcquisitionImage Analysis

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