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Monitoreo De La ElastasA NeutrófiloS Y La Actividad De La Catepsina G En Muestras De Esputo Humano
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Monitoreo De La ElastasA NeutrófiloS Y La Actividad De La Catepsina G En Muestras De Esputo Humano
1Translational Lung Research Center Heidelberg (TLRC),German Center for Lung Research (DZL), 2Dept. of Translational Pulmonology,University of Heidelberg, 3Molecular Medicine Partnership Unit (MMPU), European Molecular Biology Laboratory (EMBL),University of Heidelberg, 4Faculty of Biosciences, Collaboration for Joint Ph.D. Degree between EMBL and Heidelberg University,University of Heidelberg, 5Dept. of Pediatric Pulmonology, Immunology and Critical Care Medicine,Charité – Universitätsmedizin Berlin, 6Berlin Institute of Health (BIH), 7German Center for Lung Research (DZL), Associated Partner Site, Berlin, 8Dept. of Chemical Physiology and Biochemistry,Oregon Health and Science University
Bölümler
- 00:05Introduction
- 01:07Cell Isolation and Supernatant Separation
- 02:36Quantification of Soluble Neutrophil Serine Protease (NSP) Activity via Fluorimeter or Plate Reader Assay
- 04:13Membrane-bound NSPs Activity Measurement via Fluorescence Microscopy
- 05:30Membrane-bound NSPs Activity Measurement via Flow Cytometry
- 07:25Results: Representative Images and Quantification of Membrane-Bound NE Activity on Neutrophils Isolated from CF Patient Sputum
- 08:26Conclusion
Los protocolos aquí descritos proporcionan una guía para visualizar y cuantificar la actividad de las proteasas de neutrófilos en el esputo humano. Las aplicaciones de este tipo de análisis abarcan desde la evaluación de tratamientos antiinflamatorios hasta la validación de biomarcadores, el cribado de fármacos y los estudios clínicos de cohortes grandes.
