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Incorporación optimizada de análogos de ácidos grasos alquilinos para la detección de proteínas aciladas grasas utilizando Click Chemistry
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Biyokimya
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JoVE Journal Biyokimya
Optimized Incorporation of Alkynyl Fatty Acid Analogs for the Detection of Fatty Acylated Proteins using Click Chemistry
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Incorporación optimizada de análogos de ácidos grasos alquilinos para la detección de proteínas aciladas grasas utilizando Click Chemistry

DOI:
10.3791/62107-v

•

07:27 min

•

April 09, 2021

•

, ,
1Biyoloji Bölümü,University of Waterloo

Bölümler

  • 00:04Introduction
  • 00:44Cell Culture
  • 01:25Preparation and Saponification of Fatty Acid Analogs
  • 03:35Click Reaction on Cell Lysates
  • 04:12Click Reaction on Immunoprecipitated Proteins
  • 05:13Results: Detection of Fatty Acylated Proteins Using Click Chemistry
  • 06:57Conclusion

Özet

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El estudio de la acilación grasa tiene importantes implicaciones en las interacciones y enfermedades de las proteínas celulares. Aquí se presenta un protocolo modificado para mejorar la detección química de clics de proteínas aciladas grasas, que se puede aplicar en varios tipos de células y combinarse con otros ensayos, incluida la persecución de pulsos y la espectrometría de masas.

Etiketler

Alkynyl Fatty Acid AnalogsClick ChemistryFatty Acylated ProteinsFatty Acid LabelingMetabolic LabelingHEK-293 T-cellsBSA-bound Fatty AcidsSaponificationPotassium HydroxideFatty Acid-free BSA

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