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Eine Wasserstoff-Deuterium-Austausch-Massenspektrometrie -Plattform (HDX-MS) zur Untersuchung biosynthetischer Peptidenzyme
JoVE Journal
Biyokimya
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JoVE Journal Biyokimya
A Hydrogen-Deuterium Exchange Mass Spectrometry (HDX-MS) Platform for Investigating Peptide Biosynthetic Enzymes

Eine Wasserstoff-Deuterium-Austausch-Massenspektrometrie -Plattform (HDX-MS) zur Untersuchung biosynthetischer Peptidenzyme

DOI:

11:32 min

May 04, 2020

,

Bölümler

  • 00:04Introduction
  • 00:36Bottom-Up Liquid Chromatography-Mass Spectrometry (LC-MS) Reference Sample Workflow Preparation
  • 01:18Reference Data Processing and Peptide List Definition
  • 05:05Hydrogen-Deuterium Exchange (HDX) Reactions
  • 06:36HDX Data Processing, Analysis, and Visualization
  • 09:03Results: Reapresentative HDX-MS Peptide Biosynthetic Enzyme Evaluation
  • 10:44Conclusion

Özet

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Lanthipeptid-Synthetasen katalysieren mehrstufige Reaktionen während der Biosynthese von Peptid-Naturprodukten. Hier beschreiben wir einen kontinuierlichen, Bottom-up, Wasserstoff-Deuterium-Austausch-Massenspektrometrie (HDX-MS) Workflow, der verwendet werden kann, um die Konformationsdynamik von Lanthipeptid-Synthetasen zu studieren, sowie andere ähnliche Enzyme, die an der Peptid-Naturproduktbiosynthese beteiligt sind.

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