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Strategisches Screening und Charakterisierung des Visual GPCR-mini-G Protein Signaling Complex für eine erfolgreiche Kristallisation
Bölümler
- 00:04Introduction
- 00:45Cell Membrane Solubilization and Protein Extraction
- 03:53UV-VIS Spectroscopy
- 04:33Automated Size-Exclusion Chromatography of Rhodopsin and Rhodopsin Mini-Go Complex
- 06:04Deglycosylation
- 06:44Results: UV-VIS Spectroscopy, SEC, and SDS-PAGE
- 08:34Conclusion
Dieser Bericht beschreibt das Screening verschiedener Reinigungsmittel zur Herstellung des visuellen GPCR, Rhodopsins und seines Komplexes mit Mini-Go. Gezeigt werden biochemische Methoden, die die Qualität des Komplexes in verschiedenen Stadien während der Reinigung charakterisieren. Dieses Protokoll kann für ihre zukünftigen Strukturstudien auf andere Membranproteinkomplexe verallgemeinert werden.
