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Examen estratégico y caracterización del complejo de señalización de proteínas Visual GPCR-mini-G para una cristalización exitosa
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Strategic Screening and Characterization of the Visual GPCR-mini-G Protein Signaling Complex for Successful Crystallization
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Examen estratégico y caracterización del complejo de señalización de proteínas Visual GPCR-mini-G para una cristalización exitosa

6,683 Views

•

09:19 min

•

March 16, 2020

DOI:

10.3791/60747-v

DOI:
10.3791/60747-v

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09:19 min
March 16, 2020

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1Laboratory of Biomolecular Research,Paul Scherrer Institute, 2Biyoloji Bölümü,ETH Zürich, 3Center for Radiopharmaceutical Sciences,Paul Scherrer Institute, 4Laboratory of Molecular Biology,Medical Research Council

Özet

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Este informe describe el cribado de diferentes detergentes para la preparación del GPCR visual, la rodonina, y su complejo con mini-Go. Se demuestran métodos bioquímicos que caracterizan la calidad del complejo en diferentes etapas durante la purificación. Este protocolo se puede generalizar a otros complejos de proteínas de membrana para sus futuros estudios estructurales.

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GPCRMini-G ProteinSignal TransductionMembrane Protein ComplexDetergent ScreeningCrystallizationHEK293 CellsAffinity Purification9-cis RetinalBuffer Exchange

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Pamula, F., Mühle, J., Blanc, A., Nehmé, R., Edwards, P. C., Tate, C. G., Tsai, C. Strategic Screening and Characterization of the Visual GPCR-mini-G Protein Signaling Complex for Successful Crystallization. J. Vis. Exp. (157), e60747, doi:10.3791/60747 (2020).

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