Dergi
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Électrophorèse hybride Clear/Blue native pour la séparation et l’analyse des supercomplexes de la chaîne respiratoire mitochondriale
JoVE Journal
Biyokimya
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JoVE Journal Biyokimya
Hybrid Clear/Blue Native Electrophoresis for the Separation and Analysis of Mitochondrial Respiratory Chain Supercomplexes
DOI:

11:25 min

May 19, 2019

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Bölümler

  • 00:04Başlık
  • 01:38Supercomplex Extraction
  • 02:36Gradient Gel Casting and Electrophoresis
  • 06:50In-gel Activity for Complexes I, II, IV and V
  • 08:24Sonuçlar
  • 10:01Conclusion

Özet

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Nous présentons ici un protocole pour extraire, résoudre et identifier les supercomplexes mitochondriaux qui minimisent l’exposition aux détergents et au bleu de Coomassie. Ce protocole offre un équilibre optimal entre la résolution et la préservation des activités enzymatiques, tout en minimisant le risque de perte des interactions protéine-protéine labiles.

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