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Lo studio di RNA interattori della chinasi proteica RNA-attivato durante il ciclo cellulare dei mammiferi
JoVE Journal
Biyokimya
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JoVE Journal Biyokimya
Studying RNA Interactors of Protein Kinase RNA-Activated during the Mammalian Cell Cycle

Lo studio di RNA interattori della chinasi proteica RNA-attivato durante il ciclo cellulare dei mammiferi

DOI:

10:05 min

March 05, 2019

, ,

Bölümler

  • 00:04Başlık
  • 01:24Preparation of S or M Phase-arrested Cells
  • 02:19Formaldehyde Cross-linking
  • 04:49Immunoprecipitation
  • 07:32Results: Capturing and Analyzing PKR-interacting RNAs During the Cell Cycle Using qRT-PCR
  • 08:45Conclusion

Özet

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Vi presentiamo approcci sperimentali per studi interattori di RNA double-stranded RNA binding della chinasi di proteina RNA-attivato (PKR) durante il ciclo cellulare dei mammiferi utilizzando cellule HeLa. Questo metodo utilizza la formaldeide a crosslink RNA-PKR complessi e immunoprecipitazione per arricchire associato a PKR RNAs. Questi RNA possono essere ulteriormente analizzati mediante sequenziamento ad alte prestazioni o qRT-PCR.

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