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Étudier les Interactiens ARN de la protéine Kinase RNA-activé durant le Cycle cellulaire chez les mammifères
JoVE Journal
Biyokimya
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JoVE Journal Biyokimya
Studying RNA Interactors of Protein Kinase RNA-Activated during the Mammalian Cell Cycle

Étudier les Interactiens ARN de la protéine Kinase RNA-activé durant le Cycle cellulaire chez les mammifères

DOI:

10:05 min

March 05, 2019

, ,

Bölümler

  • 00:04Başlık
  • 01:24Preparation of S or M Phase-arrested Cells
  • 02:19Formaldehyde Cross-linking
  • 04:49Immunoprecipitation
  • 07:32Results: Capturing and Analyzing PKR-interacting RNAs During the Cell Cycle Using qRT-PCR
  • 08:45Conclusion

Özet

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Nous présentons des approches expérimentales pour étudier RNA-Interactiens de bicaténaire RNA binding protéine kinase activée par RNA (PKR) durant le cycle cellulaire chez les mammifères, à l’aide de cellules HeLa. Cette méthode utilise le formaldéhyde pour crosslink RNA-PKR complexes et immunoprécipitation pour enrichir PKR lié aux ARN. Ces ARN peut être davantage analysé par séquençage haut-débit ou qRT-PCR.

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