Dergi
/
Biyokimya
/
-Voor-stapmodus zuivering van macromoleculaire complexen met behulp van RNA gekoppeld aan biotine en een foto-cleavable Linker
JoVE Journal
Biyokimya
Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliği gereklidir.  Oturum açın veya ücretsiz deneme sürümünü başlatın.
JoVE Journal Biyokimya
Single-step Purification of Macromolecular Complexes Using RNA Attached to Biotin and a Photo-cleavable Linker
Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.

-Voor-stapmodus zuivering van macromoleculaire complexen met behulp van RNA gekoppeld aan biotine en een foto-cleavable Linker

7,066 Views

•

08:12 min

•

January 03, 2019

DOI:

10.3791/58697-v

DOI:
10.3791/58697-v

•

08:12 min
January 03, 2019

•

3 Views
, ,
1Integrative Program for Biological and Genome Sciences,University of North Carolina at Chapel Hill, 2Department of Biochemistry and Biophysics,University of North Carolina at Chapel Hill

Özet

Automatically generated

RNA/eiwitcomplexen gezuiverd met behulp van botin-streptavidine strategie worden geëlueerd oplossing onder denatureren voorwaarden in een vorm die ongeschikt zijn voor verdere zuivering en de functionaalanalyse. Hier beschrijven we een wijziging van deze strategie dat gebruik maakt van een foto-cleavable linker in RNA en een zachte UV-elutie stap, inheemse en volledig functionele RNA/eiwitcomplexen oplevert.

Explore More Videos

RNA Protein ComplexesSingle-step PurificationBiotinPhoto-cleavable LinkerMass SpectrometryT7 Generated RNAAdaptor OligonucleotideMouse Nuclear ExtractEDTAStreptavidin Agarose BeadsBinding BufferCentrifugationTube Rotation

Read Article

Cite this Article

Skrajna, A., Yang, X., Dominski, Z. Single-step Purification of Macromolecular Complexes Using RNA Attached to Biotin and a Photo-cleavable Linker. J. Vis. Exp. (143), e58697, doi:10.3791/58697 (2019).

Download .ris file

Copy

Share Video

.

Copy