Transient Expression in <em>Nicotiana Benthamiana</em> Leaves for Triterpene Production at a Preparative Scale

Michael J. Stephenson; James Reed; Bastiaan Brouwer; Anne Osbourn

doi:10.3791/58169

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Expresión transitoria en Nicotiana Benthamiana las hojas para la producción de triterpeno a escala preparativa

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Transient Expression in Nicotiana Benthamiana Leaves for Triterpene Production at a Preparative Scale

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Expresión transitoria en Nicotiana Benthamiana las hojas para la producción de triterpeno a escala preparativa

DOI:

10.3791/58169-v

•

08:56 min

•

August 16, 2018

•

Michael J. Stephenson, James Reed, Bastiaan Brouwer, Anne Osbourn

¹John Innes Centre

Bölümler

00:04Başlık
00:33Prepare Infiltration Suspension
02:11Perform Vacuum Infiltration
03:56Growth and Harvest of the Infiltrated Leaves and Pressurized Solvent Extraction
05:38Basic Ion Exchange Resin Treatment for Removal of Chlorophylls
06:58Results: Infiltration Coverage and Isolated Triterpene Product
07:49Conclusion

Özet

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Transitoria expresión heteróloga de enzimas biosintéticas en las hojas de Nicotiana benthamiana puede desviar fuentes endógenas de 2,3-oxidosqualene hacia la producción de nuevos productos de alto valor triterpeno. Es en este documento se describe un protocolo detallado para rápido (5 días) escala de preparativo de triterpenos y análogos utilizando esta potente plataforma basada en plantas.

Etiketler

Transient Expression Nicotiana Benthamiana Triterpene Production Preparative Scale Agrobacterium Tumefaciens Co-infiltration Vacuum Infiltration MMA Buffer OD 600 Preparative-scale Access Structural Characterization Medicinally Relevant Biological Activity Selective LB Agar Selective LB Media Centrifugation Resuspension Infiltration Suspension

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