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Une mesure Quantitative des espèces réactives de l’oxygène et phénotype sécrétoire associée à la sénescence dans des fibroblastes humains normaux pendant la sénescence induite par l’oncogène
JoVE Journal
Gelişim Biyolojisi
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JoVE Journal Gelişim Biyolojisi
A Quantitative Measurement of Reactive Oxygen Species and Senescence-associated Secretory Phenotype in Normal Human Fibroblasts During Oncogene-induced Senescence

Une mesure Quantitative des espèces réactives de l’oxygène et phénotype sécrétoire associée à la sénescence dans des fibroblastes humains normaux pendant la sénescence induite par l’oncogène

DOI:

13:59 min

August 12, 2018

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Bölümler

  • 00:00Başlık
  • 01:10Inducing Oncogene-induced Senescence
  • 03:11Monitoring Senescence by Senescence Associated ß-galactosidase (SA ß-gal) Staining
  • 04:27Quantifying ROS Induction during OIS
  • 06:42Quantifying IL-6 and IL-8 mRNA Expression for SASP Anaylsis using Real-time PCR
  • 08:53Quantifying the Levels of Secreted IL-6 and IL-8 Proteins for SASP Analysis using ELISA
  • 10:56Results: Representative ROS and SASP Expression Analysis during H-Ras-induced Senescence
  • 12:25Conclusion

Özet

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ROS intracellulaire a été démontré à jouer un rôle important dans l’induction de la sénescence cellulaire. Nous décrivons ici une analyse sensible pour quantifier les niveaux ROS au cours de la sénescence cellulaire. Nous fournissons également des protocoles d’évaluation le phénotype sécrétoire associée à la sénescence, qui aurait été contribue à diverses dysfonctions liées à l’âge.

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