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Une approche de mutagenèse roman Saturation : Seule étape caractérisation des protéines régulatrices accepteurs en ARN utilisant Phosphorothioates
JoVE Journal
Genetik
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JoVE Journal Genetik
A Novel Saturation Mutagenesis Approach: Single Step Characterization of Regulatory Protein Binding Sites in RNA Using Phosphorothioates

Une approche de mutagenèse roman Saturation : Seule étape caractérisation des protéines régulatrices accepteurs en ARN utilisant Phosphorothioates

DOI:

11:49 min

August 21, 2018

Bölümler

  • 00:04Başlık
  • 00:30Generation of a Library of Mutants – Doping DNA Template with Non-wild Type Nucleotides
  • 01:20Synthesis of RNA
  • 05:24Protein Binding Reaction and Separation of Bound RNA
  • 08:05Analysis of Iodine-cleaved Phosphorothioate Products for Detection of Mutant Nucleotide Positions
  • 09:07Results: Characterization of Protein Binding Site in RNA
  • 10:22Conclusion

Özet

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Les protéines qui se lient à des séquences d’ARN spécifiques jouent un rôle crucial dans l’expression des gènes. Une caractérisation détaillée de ces sites de liaison est cruciale pour notre compréhension de la régulation des gènes. Ici, une approche pas à pas pour la mutagénèse de saturation des sites de liaison protéique dans l’ARN est décrite. Cette approche est pertinente pour tous les sites de liaison aux protéines dans l’ARN.

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