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JoVE Journal İmmünoloji ve Enfeksiyon
Visualizing Intracellular SNARE Trafficking by Fluorescence Lifetime Imaging Microscopy
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Visualisation de SNARE intracellulaire traite par Fluorescence Lifetime Imaging Microscopy

DOI:
10.3791/56745-v

•

08:55 min

•

December 29, 2017

•

, , ,
1Department of Tumor Immunology,Radboud University Medical Center

Bölümler

  • 00:05Başlık
  • 00:37Preparation of the Microscopy Samples
  • 01:49Recording of the FLIM Data
  • 03:34Conversion of the Photon Recordings to FLIM Images
  • 04:19Fitting of Fluorescence Lifetime Histograms for Whole-cell FLIM Analysis
  • 06:03Results: Syntaxin 4 and VAMP3 Interaction in Live Cell Visualized by FRET-FLIM
  • 07:43Conclusion

Özet

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Ce protocole décrit une nouvelle méthode permettant la visualisation quantitative de la formation d’un complexe de protéines SNARE, basée sur le transfert d’énergie Förster et durée de vie de fluorescence imaging microscopy.

Etiketler

SNAREFLIMMembrane TraffickingHeLa CellsSyntaxin-4VAMP3Syntaxin-3MCitrineMCherryFluorescence Lifetime Imaging MicroscopyConfocal MicroscopyInstrument Response Function

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