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Cella singola quantificazione dei tassi di degradazione delle proteine mediante microscopia a fluorescenza time-lapse in coltura delle cellule aderenti
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Cella singola quantificazione dei tassi di degradazione delle proteine mediante microscopia a fluorescenza time-lapse in coltura delle cellule aderenti
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12:06 min
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February 04, 2018
DOI:
Özet
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Questo protocollo descrive un metodo per determinare la proteina emivite in singole cellule aderenti, utilizzando impulsi etichettatura e time-lapse imaging di fluorescenza di proteine di fusione SNAP-tag.
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Protein DegradationSingle-cellTime-lapse Fluorescence MicroscopyAdherent Cell CultureSNAP-tagProtein Half-lifeFluorescence ImagingProtein TurnoverHeterogeneityEndogenous Protein TaggingOverexpressionDNA Repair EnzymeBenzylguanineFluorescent DyeExponential DecayEmbryonic Stem CellsMonolayerCell-cell InteractionsN-cadherin
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Alber, A. B., Suter, D. M. Single-Cell Quantification of Protein Degradation Rates by Time-Lapse Fluorescence Microscopy in Adherent Cell Culture. J. Vis. Exp. (132), e56604, doi:10.3791/56604 (2018).
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