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Une méthode de Culture Alternative pour maintenir l’hypométhylation génomique des cellules souches embryonnaires de souris à l’aide de MEK inhibiteur PD0325901 et vitamine C
JoVE Journal
Biyokimya
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An Alternative Culture Method to Maintain Genomic Hypomethylation of Mouse Embryonic Stem Cells Using MEK Inhibitor PD0325901 and Vitamin C

Une méthode de Culture Alternative pour maintenir l’hypométhylation génomique des cellules souches embryonnaires de souris à l’aide de MEK inhibiteur PD0325901 et vitamine C

DOI:

11:53 min

June 01, 2018

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Bölümler

  • 00:04Başlık
  • 00:57Grow Mouse ES Cells on Gelatin-coated Dishes
  • 02:48Extract DNA from Cells and Enzymatic Digestion of DNA into Single Nucleosides
  • 05:29Analyze 5mC and 5hmC Using UHPLC-MS/MS
  • 08:34Results: Methylation Status of Mouse Embryonic Stem Cells
  • 10:17Conclusion

Özet

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Nous avons décrit en détail deux protocoles de base chimique pour la culture des cellules souches embryonnaires de souris. Cette nouvelle méthode utilise des mécanismes synergiques de promouvoir l’oxydation induite par le Tet (par la vitamine C) et réprimant la synthèse de novo de la 5-méthylcytosine (par PD0325901) pour maintenir l’hypométhylation de l’ADN et la pluripotence des cellules souches embryonnaires de souris.

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