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Fluorométrie de tension-serre dans<em> Xenopus</em> Oocytes utilisant des acides aminés fluorescents non naturels
JoVE Journal
Biyokimya
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JoVE Journal Biyokimya
Voltage-clamp Fluorometry in Xenopus Oocytes Using Fluorescent Unnatural Amino Acids

Fluorométrie de tension-serre dans<em> Xenopus</em> Oocytes utilisant des acides aminés fluorescents non naturels

DOI:

09:24 min

May 27, 2017

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Bölümler

  • 00:05Başlık
  • 01:03Oocyte Preparation and Injection
  • 04:16VCF Setup
  • 05:35VCF Recording
  • 07:44Results: Two-color VCF with Anap and TMR
  • 08:27Conclusion

Özet

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Cet article décrit une amélioration de la Fluorométrie conventionnelle en tension-clamp (VCF) où les acides aminés non naturels fluorescents (fUAA) sont utilisés à la place des colorants maléimidés, pour sondage des réarrangements structurels dans les canaux ioniques. La procédure comprend l'injection d'ADN ovocytaire de Xenopus, la co-injection d'ARN / fUAA et les mesures simultanées de courant et de fluorescence.

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