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탠덤 동질 정제를 사용하여 단백질 나누기 파트너의 식별
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Identification of Protein Interacting Partners Using Tandem Affinity Purification
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탠덤 동질 정제를 사용하여 단백질 나누기 파트너의 식별

DOI:
10.3791/3643-v

•

10:02 min

•

February 25, 2012

•

, , ,
1Section of Virology, Department of Medicine,Imperial College London

Bölümler

  • 00:05Başlık
  • 01:30Transfection
  • 02:20Cell Lysis
  • 03:30Binding to Rabbit IgG-agarose
  • 04:53TEV Protease Cleavage
  • 05:48Binding to Immobilized Streptavidin Beads
  • 07:50Biotin Elution of the Streptavidin Binging Peptide and Bait Protein

Özet

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탠덤 친화 정화 단백질 바인딩 파트너의 식별을위한 강력한 접근이다. 개념 증명으로서,이 방법론은 숙주 세포의 요인 번역 개시에 관여 공동 침전물에 잘 특성화 번역 개시 인자의 eIF4E에 적용되었다. 이 방법은 쉽게 다른 세포 또는 바이러스성 단백질에 적응하고 있습니다.

Etiketler

Protein Interacting PartnersTandem Affinity PurificationIdentification Of Interacting ProteinsYeast Two Hybrid SystemPull Down AssaysImmunoprecipitationMass Spectrometry IdentificationDouble-affinity Tag Mediated PurificationTAPEukaryotic Translation Initiation Factor EIF4ECellular Translation Factor EIF4EEIF4F ComplexCap-dependent Translation InitiationProtein G UnitsStreptavidin Binding PeptideTobacco Etch Virus (TEV) Protease Cleavage Sequence

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