Özet

小鼠远端眶下神经慢性缩窄损伤 (DIoN-CCI) 研究三叉神经性疼痛

Published: March 08, 2024
doi:

Özet

小鼠远端眶下神经的慢性收缩损伤会引起自发行为(面部梳理活动增加)和伤害行为的变化,以响应触觉刺激(对 von Frey 头发刺激的高反应性),这是持续疼痛和异常性疼痛的迹象,并作为三叉神经性疼痛的模型。

Abstract

动物模型仍然是研究神经性疼痛的必要工具。本手稿描述了远端眶下神经慢性缩窄损伤 (DIoN-CCI) 模型,用于研究小鼠的三叉神经性疼痛。这包括执行慢性缩窄性损伤的外科手术和术后行为测试,以评估自发和诱发行为的变化,这些变化是持续疼痛和机械性异常性疼痛的迹象。方法和行为读数类似于大鼠的眶下神经慢性收缩损伤 (IoN-CCI) 模型。然而,为了使 IoN-CCI 模型适应小鼠,需要进行重要的更改。首先,眼眶内入路被更喙入路所取代,在眼睛和胡须垫之间有一个切口。因此,IoN 在眶腔外的远端连接。其次,由于小鼠的运动活动较高,允许大鼠在小笼子中自由移动被将小鼠置于定制设计和制造的约束装置中所取代。DIoN 连接后,小鼠表现出自发行为的变化和对 von Frey 毛发刺激的反应变化,这与 IoN-CCI 大鼠相似,即增加定向面部梳理和对 IoN 区域的 von Frey 毛发刺激的高反应性。

Introduction

神经性疼痛是由于体感神经系统受损引起的,导致感觉信号异常地传递到大脑。躯体感觉神经损伤并不总是导致神经性疼痛,但患病率随着临床神经病变的严重程度而增加 1,2。神经性疼痛患者会出现特定症状,例如自发感觉(灼热感、针刺感、电感)和异常剧烈或长时间的疼痛,以及对无害或有害刺激的异常强烈或长时间的疼痛,这些刺激往往会变成慢性的,并且对常规止痛药物治疗有抵抗力3。神经性疼痛研究领域的重大进展源于发现大鼠坐骨神经周围的松散收缩结扎会导致类似于人类神经性疼痛状况的行为4。这些动物对热、冷和机械刺激的阈值降低,并表现出伤害性行为。尽管人类和啮齿动物之间的疼痛处理存在固有的生物学差异,但动物模型是研究神经性疼痛发展的潜在机制和测试新提出的治疗策略的宝贵工具。

基于感觉反射的疼痛测试范式已广泛用于神经性疼痛模型,但考虑到这些是影响生活质量的常见临床症状,测量持续疼痛或其他经常伴随的障碍(睡眠障碍、抑郁、焦虑)并未得到足够的重视 5,6,7,8 .大鼠的面部梳理行为已被证明是眶下神经 (IoN) 慢性收缩损伤 (CCI) 后自发性神经性疼痛的衡量标准9,10。此外,大鼠还对 IoN 区域的轻度触觉刺激产生高反应性,这表明机械异常性疼痛。

与小鼠相比,由于大鼠的体型较大,它们更适合手术损伤。然而,小鼠具有成本和空间效率,并且需要的药物量较少。此外,转基因技术的出现进一步促进了小鼠的使用11,12。因此,该程序的总体目标是在小鼠中进行手术眶下神经损伤,类似于大鼠,诱导自发和诱发行为的变化,以研究三叉神经性疼痛。

Protocol

根据国际疼痛研究协会 (International Association for the Study of PAIN) 的清醒动物疼痛研究指南,并符合佛兰德和欧洲动物研究法规以及 ARRIVE 指南,对动物进行治疗和照料。该协议由机构伦理委员会批准。 1. 动物 使用雄性和雌性 C57BL/6J 小鼠 (Janvier,到达时 10 周龄)。 将雄性和雌性小鼠分别饲养在湿度为 40%-60% 且室温 (RT)…

Representative Results

DIoN-CCI 小鼠在术后孤立面部修饰所花费的时间和孤立面部修饰发作次数的显著增加(图 3)。最强的增加发生在术后第一周,然后在接下来的几周内变得更小,但至少在 6 周内显著增加。身体美容期间的面部美容或多或少不受影响。 在 DioN-CCI 后的第一周内,DIoN-CCI 小鼠对同侧 IoN 区域的同侧机械刺激几乎完全没有反应(<strong cla…

Discussion

在大鼠中,先前已经争论认为,考虑到完整的精细肌肉组织控制震颤触觉辨别中复杂搅拌模式的重要性以及中线切口到皮肤眶下神经区域的相对距离10,IoN 的眶内入路是可取的。其他人则认为,通过切口进入振震垫尾部的毛状皮肤的远端入路有很多好处13,14。从手术上讲,这是一种更简单的微创技术。它可以?…

Açıklamalar

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

作者没有致谢。

Materials

Chromic catgut (6-0) Dynek  CG602D ligatures
Cotton applicator Pharmacy
Digital video camera Sony HDR-CX330E
Dumont #5 forceps Fine Science Tools 11251-10
Dumont forceps – Micro-blunted tips (#5/45) Fine Science Tools 11253-25
Duratears Alcon 0037-820 ophthalmic ointment
Hooked ligation aid Fine Science Tools 18062-12
Ketalar Pfizer ketamine (50 mg/mL)
Operation microscope Kaps SOM 62
Precision cotton swab Qosina 10225
Precision trimmer Philips HP6392/00
Rompun Bayer xylazine (2%)
Scissors – blunt tips Fine Science Tools 14574-09
Semmes-Weinstein Von Frey Aesthesiometer kit Stoelting 58011
Vicryl Rapide Ethicon MPVR489H sutures

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Deseure, K. R., Hans, G. H. Chronic Constriction Injury of the Distal Infraorbital Nerve (DIoN-CCI) in Mice to Study Trigeminal Neuropathic Pain. J. Vis. Exp. (205), e66420, doi:10.3791/66420 (2024).

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