纤维蛋白富集和 tPA 敏感的光血栓形成卒中模型

血管内血栓切除术和 tPA 介导的溶栓是美国食品和药物管理局 （FDA） 批准的仅有的两种急性缺血性卒中疗法，美国每年有 ~700,000 名患者患病¹。由于血栓切除术的应用仅限于大血管闭塞 （LVO），而 tPA 溶栓术可以缓解小血管闭塞，因此两者都是急性缺血性卒中² 的有价值的治疗方法。此外，两种疗法的联合使用（例如，在卒中发作后 4.5 小时内开始 tPA 溶栓，然后进行血栓切除术）可改善再灌注和功能结局³。因此，即使在血栓切除术时代，优化溶栓仍然是卒中研究的重要目标。

血栓栓塞模型是临床前卒中研究的重要工具，旨在改善溶栓治疗。这是因为机械血管闭塞模型（例如，腔内缝合 MCA 闭塞）不会产生血凝块，并且其在去除机械闭塞后脑血流的快速恢复被过度理想化 ^4,5。迄今为止，主要的血栓栓塞模型包括光血栓形成 ^6,7,8、局部氯化铁 （FeCl 3） 应用⁹、凝血酶显微注射到 MCA 分支 10,11、体外（微）栓子注射到 MCA 或颈总动脉 （CCA） 12、13^、14 和短暂性缺氧缺血 （tHI）^{15,16，17,18}.这些卒中模型在随后血栓的组织学组成和对tPA介导的裂解疗法的敏感性方面有所不同（表1）。它们在开颅手术要求（原位凝血酶注射和局部应用 FeCl₃ 需要）、梗死大小和位置的一致性（例如，CCA 输注微栓子产生非常可变的结果）以及对心血管系统的总体影响（例如，tHI 增加心率和心输出量以补偿缺氧诱导的外周血管舒张）方面也有所不同。

基于 RB 染料的光血栓卒中 （PTS） 模型具有许多吸引人的特征，包括简单的无开颅手术、低死亡率（通常< 5%）以及可预测的梗死大小和位置（在 MCA 供应区域），但它有两个主要局限性。⁸ 首先需要注意的是，对 tPA 介导的溶栓治疗反应弱至零，这也是 FeCl₃ 模型⁷、^19、20 的缺点。PTS 和 FeCl₃ 卒中模型的第二个警告是，随后的血栓由密集的血小板聚集体和少量纤维蛋白组成，这不仅导致其对 tPA 溶解治疗的弹性，而且还偏离了急性缺血性卒中患者中血小板：纤维蛋白血栓混合的模式^21,22。相比之下，原位凝血酶显微注射模型主要包括聚合纤维蛋白和不确定含量的血小板¹⁰。

鉴于上述推理，我们假设 RB 和亚血栓形成剂量的凝血酶的混合物通过变薄的颅骨进行 MCA 靶向光活化可能会增加所得血栓中的纤维蛋白成分并提高对 tPA 介导的裂解治疗的敏感性。我们已经证实了这一假设，²³ 在此我们描述了改良 （T+RB） 光血栓中风模型的详细程序。