Un nouveau modèle de Enteroid épithéliales humaines d’entérocolite nécrosante

Enteroids humains sont un ex vivo système de culture 3 dimensions généré à partir de cellules souches isolées de cryptes intestinales des échantillons de tissu intestinal humain. Ce modèle révolutionnaire a été lancé par Hans Clevers et coll. en 2007 suite à la découverte de Lgr5 + des cellules souches dans les cryptes de l’intestin grêle dans la souris¹. Leur travail a jeté les bases pour l’établissement d’un ex vivo la culture épithéliale intestinale de plusieurs types de cellules qui pourraient être repiquées sans modifications génétiques ou physiologiques importantes². Depuis cette découverte, enteroids ont servi comme un nouveau modèle pour étudier la physiologie digestive normale et la physiopathologie des maladies intestinales telles que les maladies inflammatoires de l’intestin, interactions hôte-pathogène et la médecine régénérative,².

L’utilisation d’enteroids comme un ex vivo de modèle pour l’étude de la physiopathologie intestinale présente plusieurs avantages sur les autres techniques. Pour les dernières décennies, les modèles animaux et lignées cellulaires dérivées de cancer intestinal immortalisées ont servi à étudier la physiologie intestinale^3,4,5. Single-cell cultures ne représentent pas la diversité des types de cellules présents dans l’épithélium intestinal normal, manquant ainsi une cellule à la diaphonie et segment-spécificité dans l’expression de la protéine, la signalisation et la maladie induite par l’agent pathogène⁶. Enteroids les cellules souches se différencient en les principaux types de cellules épithéliales comme les entérocytes, cellules de Paneth, cellules caliciformes, cellules entéroendocrines et plus³. Ils présentent la polarité, assure les fonctions de transport épithélial et permettant un segment intestinal spécificité⁶. Étant donné qu’enteroids peut récapituler les multiples types de cellules de l’épithélium intestinal humain, ils sont capables de surmonter cette limitation reconnue des systèmes basés sur les cellules de cancer. Au fil du temps, dérivés de lignées cellulaires sont sous-cloné et d’évoluent pour exposer une plus grande diversité d’expression et la localisation protéine³. Au contraire, les enteroids peuvent être repiquées sans modifications génétiques ou physiologiques importantes². Bien qu’il existent de nombreux modèles animaux pour NEC, réponse à des blessures et des interventions thérapeutiques peut-être être très variable entre les espèces. En raison de ces limitations, produits thérapeutiques dérivés de modèles animaux ne parviennent pas à 90 % du temps lorsqu’il est testé dans des essais humains en raison de différences dans la toxicité ou l’efficacité³. Enteroids servir de modèles précliniques prometteurs qui peuvent surmonter ces insuffisances, conduisant à une meilleure compréhension de la physiopathologie intestinale complexe et donc plus efficace et rentables des innovations thérapeutiques. Il y a aussi des éléments de preuve récente que l’âge des tissus qui ont un enteroid est généré reste biologiquement importants⁷. Il s’agit d’un détail particulièrement important pour notre modèle puisque les enteroids sont générés à partir du tissu néonatal, ainsi maintenir la pertinence physiologique aux patients avec NEC.

L’utilité d’enteroids comme modèles de maladies humaines continue à se développer, dans l’espoir de trouver des remèdes aux conditions graves et profondes. L’entérocolite nécrosante (NEC) est une maladie dévastatrice intestinale des nouveaux-nés que se caractérise par une nécrose intestinale et fréquemment conduit à la perforation de la paroi intestinale, septicémie et mort⁸. En raison de la physiopathologie complexe et multifactorielle de l’entérocolite Nécrosante, le mécanisme exact de la maladie n’a pas encore été complètement élucidé ; Cependant, une augmentation de la perméabilité intestinale a été clairement impliquée dans le processus de la maladie⁸. Étant donné que l’étude de NEC et agents thérapeutiques potentiels est éthiquement difficile sur des sujets humains, en particulier les enfants, il est hautement souhaitable d’utiliser un modèle d’enteroid biologiquement pertinente de NEC à l’aide de tissus humains néonatale. Jusqu’ici, les enteroids ont un rôle limité dans l’étude de l’entérocolite Nécrosante. Ce protocole décrit l’utilisation d’enteroids provenant d’échantillons de tissu intestinal humain comme un roman ex vivo de modèle pour l’étude de l’entérocolite nécrosante.