建立与艾滋病毒相关的肝脏发病机制的双人性化TK-NOG小鼠模型

自抗逆转录病毒疗法问世以来，与艾滋病毒-1单一感染有关的死亡人数已大大减少。然而，肝病已成为艾滋病病毒感染者^{发病的常见原因1，2。}肝炎病毒感染与HIV-1感染比较常见，占美国艾滋病病毒感染者的10%-30%，3、4、5。

HIV-1和肝炎病毒的宿主特异性限制了小动物模型研究人类特定传染病或研究HIV-1相关肝脏发病机制的多个方面的效用。免疫缺陷小鼠，允许移植人体细胞和/或组织（称为人化小鼠模型）是可以接受的动物模型为临床前研究6，7，8。自21世纪初引入人化小鼠以来，多次对胆囊静物人类肝毒性、人类特异性病原体（包括HIV-1和HIV相关神经认知障碍、爱泼斯坦巴尔病毒、肝炎等）进行临床前研究传染病，已对这些小鼠进行了6、9、10、11的调查。CD34⁺ HSPCs和/或人类肝细胞移植的多种小鼠模型早已开发出来，并随着时间的推移得到了改进，以研究乙型肝炎病毒（HBV）相关肝病的疾病发病^{机制12，13,14.}HSPC和人肝细胞移植的几个模型基于菌株，称为NOG（NOD）。Cg-Prkdc^scid Il2rg^tm1Sug/JicTac）^8，13， NSG （NOD.Cg-Prkdc^scid Il2rg^tm1Wjl/SzJ）¹⁵， 巴尔布/C-拉格2^{-/- —–（}拉格2^tm1.1Flv Il2rg^tm1.1Flv/J）^12，和fah^-/- NOD rag1^—il2ré_null^鼠标16。但是，每个模型都有自己的优点和局限性;例如，AFC8 在 Balb/C-Rag2^{-/- —c -/-}背景上为 HEP 和人类干细胞 （HSCs） 提供双人机小鼠，使免疫细胞和 HSC 能够成功移植，但不存在抗原特异性 T 细胞和 B 细胞在此模型¹²中响应 。在重组双人性小鼠时，主要关切包括次优移植、缺乏支持不同组织的合适模型、不匹配的条件、免疫排斥或移植-宿主疾病（GVHD）和技术困难，如与新生儿的风险操纵和高死亡率由于代谢^异常13。

虽然人类化小鼠已用于艾滋病研究多年17、18、19，但使用人化小鼠研究HIV-1对肝脏的损害已经^有限20。我们之前曾报道建立了双重人性化的TK-NOG小鼠模型，并将其应用于与艾滋病毒相关的^肝病8。该模型显示了肝脏和免疫细胞的强健移植，并重述了HIV感染的发病机制。本讨论提出了详细的方案，包括人类肝细胞移植中最关键的步骤。还介绍了成功移植HEP和在TK-NOG小鼠中建立功能免疫系统所需的HSPCs。详细介绍了这些小鼠研究HIV相关肝脏免疫机原机制。使用TK-NOG雄性小鼠携带肝脏特异性疱疹单纯疱疹病毒类型1胸腺激酶（HSV-TK）转基因。表达这种转基因的小鼠肝细胞在短暂接触无毒剂量的GCV后，很容易被消融。移植的人类肝细胞在小鼠肝脏内保持稳定，没有外源性^药物21。小鼠还预置了非骨髓剂量的三硫丹，为人类^细胞8在小鼠骨髓中创造一个利基。免疫缺陷的TK-NOG小鼠在脾脏注射了HEP和多能的HSPCs。然后，通过血液免疫造影和分别测量血清人-白蛋白水平，定期监测小鼠的血液和肝脏重组。成功重组超过15%的小鼠为人体免疫细胞和HEP注射HIV-1。艾滋病毒对肝脏的影响最早可在感染后4-5周内评估。必须指出，由于使用了HIV-1，在处理病毒并将其注射到小鼠体内时，必须采取一切必要的预防措施。