L’obiettivo del presente protocollo è quello di fornire un modello animale di impianto cocleare, che può essere utilizzato per affrontare una moltitudine di domande di ricerca. Le applicazioni potenziali includono la valutazione degli interventi farmaceutici o stimolazione elettrica per effetti benefici sulle soglie uditive o impedenze elettrodo.
Gli impianti cocleari sono dispositivi altamente efficiente che possono ripristinare l’udito in soggetti con ipoacusia profonda. A causa dei risultati di percezione vocale migliorata, criteri di candidatura sono stati ampliati nel corso degli ultimi decenni. Questo include i pazienti con udito residuo sostanza che beneficiano di stimolazione elettrica e acustica dell’orecchio stesso, che rende la preservazione dell’udito durante l’impianto cocleare una questione importante. Impedenze elettrodo e il problema correlato del consumo di energia è un altro campo di ricerca più importanti, come i progressi in questo settore potrebbero spianare la strada per la protesi acustica completamente impiantabile. Per risolvere questi problemi in modo sistematico, modelli animali adeguate sono essenziali. Pertanto, l’obiettivo del presente protocollo è quello di fornire un modello animale di impianto cocleare, che può essere utilizzato per affrontare varie domande di ricerca. A causa della sua grande bulla timpanica, che permette un facile accesso chirurgico all’orecchio interno, come pure la sua gamma di udienza che è relativamente simile all’intervallo di udienza degli esseri umani, la cavia è una specie comunemente utilizzate nella ricerca uditiva. L’impianto cocleare nella cavia è realizzato tramite un approccio retroauricular. Attraverso la bullostomy un cochleostomy è forato e l’elettrodo di impianto cocleare è inserito nel tympani di scala. Questo elettrodo può essere utilizzato quindi per stimolazione elettrica, determinazione delle impedenze elettrodo e la misura dei potenziali d’azione composti del nervo uditivo. Oltre a queste applicazioni, impianto cocleare elettrodi utilizzabile anche come dispositivi di somministrazione del farmaco, se una consegna d’attualità degli agenti farmaceutici alle cellule o fluidi dell’orecchio interno sono destinati.
Più di 500 milioni di persone nel mondo soffrono di perdita dell’udito. 1 . Impaired udienza è stato collegato ad un più alto tasso di depressione, bassa autostima e inferiori sentimenti di autostima, che portano al peggioramento della qualità della vita tutte. 2 mentre apparecchi acustici sono un modo adeguato per ripristinare la funzione sensitiva nei casi di moderata perdita dell’udito, la modalità di trattamento più efficace per i pazienti affetti da ipoacusia profonda è l’impianto cocleare (IC). Dovuto i risultati eccellenti per quanto riguarda la percezione del linguaggio, criteri di candidatura per l’impianto cocleare ora inoltre includono i pazienti dis che hanno notevole residuo dell’udito della regione di bassa frequenza, ma non beneficiano di apparecchi acustici. 3 dal momento che questi pazienti possono uso combinato di stimolazione elettrica e acustica nell’orecchio impiantato, preservazione dell’udito è diventata una questione importante per i chirurghi CI. Durante l’impianto cocleare, un array di elettrodi viene inserito nel tympani di scala della coclea, dove stimola elettricamente il nervo uditivo. 4 il trauma di inserimento elettrodo pone un rischio per l’udito residuo e induce la fibrosi, che aumenta le impedenze elettrodo e consumo della batteria dell’impianto. Così, modelli per lo studio di interventi farmaceutici che possono ridurre la perdita della capacità uditiva e la fibrosi causata tramite l’inserzione dell’elettrodo sono essenziali.
La cavia è un modello animale adatto e conveniente per il CIs, a causa del più facile e più riproducibile accesso chirurgico all’orecchio interno rispetto ai gerbilli, ratti o topi. 5 , 6 , 7 , 8 inoltre, la gamma di udienza di questa specie è relativamente paragonabile per l’udito umano. 9 le specie più grandi come gatti o scimmie, che sono stati utilizzati per indirizzo ricerche specifiche domande relative al CIs, non rappresentano una scelta ragionevole per la maggior parte CI studi per motivi sia etici che finanziarie. 10 , 11
In sintesi, la cavia è un modello affidabile e relativamente conveniente per valutare gli effetti degli interventi farmacologici nella regolazione dell’impianto cocleare.
Il protocollo presentato descrive come eseguire l’impianto cocleare nel modello di cavia. Questo protocollo può essere usato per valutare diversi interventi per i loro effetti sul residuo uditivo e reazione da corpo estraneo all’elettrodo di CI. Alcune precauzioni dovrebbero adottare per conseguire un’elevata riproducibilità e accuratezza degli esperimenti.
Le soglie uditive della linea di base di tutte le cavie devono essere misurate preoperatively usando ad esempio le risposte uditive del tronco cerebrale. Alcune delle cavie disponibili in commercio presentano una perdita uditiva rilevanti e pertanto non devono essere inclusi nel gruppo sperimentale. A seconda della lunghezza della chirurgia e protocollo che questa valutazione può essere eseguita sia immediatamente prima della chirurgia o pochi giorni prima l’impianto cocleare, dando l’animale tempo sufficiente per recuperare dall’anestesia.
Quando eseguire l’intervento in anestesia generale in un spontaneamente respirazione animale, la velocità è importante. Pertanto, meticolosa preparazione prima dell’intervento chirurgico è essenziale, così come la scelta del protocollo anestetico. L’uso di ketamina, medetomidina, midazolam e fentanil in combinazione con i risultati di anestesia locale in un sufficiente anestesia e analgesia, mentre allo stesso tempo l’animale continua a respirare spontaneamente. Rispetto all’uso di ketamina e xilazina spesso descritto, questo regime si traduce in migliore analgesia e perioperatoria ridotta morbilità e mortalità. È importante avere tutti gli strumenti e i farmaci (tra cui un booster degli anestetici) prontamente disponibile prima di mettere l’animale a dormire.
A causa di cambiamenti di posizione degli animali durante l’intervento chirurgico (cambiando da posizione prona a posizione laterale e posteriore), esiste un rischio di aspirazione dello stomaco contenuto ai polmoni. Per questo motivo, il protocollo comprende anche l’applicazione di un tubo di stomaco, che è un modo facile e veloce per proteggere l’animale dall’aspirazione e ridurre la mortalità perioperatoria.
Per mantenere la sterilità durante il ri-posizionamento, le zone dove l’animale è toccato c’è bisogno di essere coperti da teli sterili, guanti devono essere modificate successivamente o ri-posizionamento deve essere fatto da un altro individuo che non è sterile.
O2-monitoraggio saturazione è inoltre di estrema importanza durante l’intervento chirurgico. Il posizionamento della testa necessaria per la visualizzazione del promontorio e nicchia della finestra rotonda può causare un’ostruzione delle vie respiratorie, che possono essere maneggiate facilmente quando identificato abbastanza presto.
Di solito gli animali perdono una grande quantità di fluidi corporei (es. sangue, fluido extra cellulare, urina) durante l’intervento chirurgico. Di conseguenza, il protocollo di sostituzione fluido introdotto in questo manoscritto rappresenta un metodo ben tollerato per stabilizzare l’emodinamica degli animali e sostiene il loro veloce recupero dall’anestesia.
Al fine di evitare errori quando si eseguono misurazioni audiometrical, è consigliabile connettersi lo stesso pin del connettore a un elettrodo specifico durante ogni intervento chirurgico.
Una limitazione di questo metodo è la variabilità relativamente elevate spostamenti della soglia uditiva postoperatoria, che spesso non correlano bene con la percezione del chirurgo. Anche se questa variabilità nei risultati è simile la situazione in umana CI destinatari con residuo uditivo, esso completamente non è capito quali sono le cause di risultati variabili. 16 , 17 , 18 In generale, la variabilità diminuisce con il tempo e l’esperienza del chirurgo. È importante evitare forze eccessive durante l’inserimento dell’elettrodo, che può essere raggiunto con una velocità lento inserimento. Perché l’inserimento accurato di un elettrodo CI può provocare solo perdita di udito molto limitato, il protocollo presentato descrive un ripetuto inserimento dell’elettrodo, che provoca un più alto e più prevedibile perdita dell’udito. Questa perdita dell’udito è più pronunciata nella zona ad alta frequenza, tra 16 e 32 kHz. Poiché il trauma intracochlear dipende la profondità di inserimento, la morfologia della coclea e l’approccio (cochleostomy contro inserimento finestra rotonda) devono essere presi in considerazione. Inserimento dell’elettrodo attraverso la membrana della finestra rotonda, di solito eseguita in impianto cocleare di conservazione dell’udito umano, CI è stato utilizzato anche nel modello di cavia. 19 perché la membrana della finestra rotonda è nascosto nella cavia e inserimento dell’elettrodo attraverso i risultati di membrana rotonda della finestra in un angolo di inserimento sfavorevole, un cochleostomy di perforazione porta a spostamenti più prevedibili della soglia dell’udito. Questo protocollo propone l’uso di un bisturi invece di un trapano per l’apertura della bulla timpanica, perché ciò si traduce in un’esposizione di riduzione del rumore dell’orecchio per essere impiantati. Una valutazione istologica delle orecchie inner affrontare la reazione da corpo estraneo all’elettrodo, la quantità di cellule ciliate e cellule del ganglio spirale nonché di trauma alle strutture come la lamina a spirale osseous e tassi di traslocazione elettrodo devono essere eseguiti in tutto impiantato le orecchie, come questi risultati facilitano la migliore comprensione dei risultati funzionali misurati. 12 , 20
The authors have nothing to disclose.
Gli autori vogliono ringraziare Sandra Peiritsch per la cura degli animali e Noelani Peet per scrivere in medicina. Il sostegno finanziario dal fondo austriaco di scienza (FWF grant P 24260-B19) e Austria MED-EL si ringraziano.
Scale | |||
Oxygen insufflator | |||
Shaver | |||
Sucker | |||
Povidone Iodine Solution | |||
Alcohol | |||
Laryngoscope | |||
Stomach tube | Fr 06, Lg 80 cm | ||
Surgical binocular microscope | |||
Drill | |||
0.5 mm diamond burr | |||
1 mm diamond burr | |||
Heating plate | |||
Pulse oximeter | |||
Tissue glue | |||
Dental cement powder | |||
Fluid for dental cement powder | |||
Bipolar cautery | |||
Gauze compress | |||
Cotton bud | |||
Cement mixing bowl | |||
Teflon insulated gold wire | 99.99 % gold, diameter: 0.125 mm, isolation: 0,016 mm, PTFE (Polytetrafluoroethylen) | ||
Scalpel with blade No. 10 | |||
Scalpel with blade No. 15 | |||
Scissors | |||
Mosquito forceps | |||
Dressing forceps | |||
Tissue forceps | |||
Delicate dressing forceps 2X | |||
Micro forceps | |||
Screw driver | |||
Stainless steel screws | diameter: 1 mm | ||
Retractor | |||
Needle probe | |||
Spatula | |||
Needle holder | |||
5-0 absorbable sutures | |||
Needle 23G | |||
Needle 27G | |||
Medetomidine 1 mg/mL | 0.36 mg/kg | ||
Midazolam g mg/mL | 1.2 mg/kg | ||
Fentanyl 50 µg/mL | 0.036 mg/kg | ||
Ketamine 100 mg/mL | 12 mg/kg | ||
Lidocaine (local anesthesia) | 4 mg/kg | ||
Atipamezole 5 mg/mL | 1 mg/kg | ||
Flumazenil 0.1 mg/mL | 0.1 mg/kg | ||
Enrofloxacin 100 mg/mL | 7 mg/kg | ||
Buprenorphin 0.3 mg/mL | 0.05 mg/kg | ||
Physiological Saline (at body temperature) | 12.5 mL/Kg (pre-surgery) | ||
Glucose 5 % (preoperative, at body temperature) | 12.5 mL/Kg | ||
Physiological Saline (at body temperature) | 25 mL/kg (post-surgery) |